氮素水平對(duì)紅花大金元煙葉游離氨基酸和蛋白質(zhì)含量的影響

　　摘要：為了解氮索水平對(duì)云南煙區(qū)紅花大金元煙葉游離氨基酸和蛋白質(zhì)含量的影響，通過(guò)田間試驗(yàn)設(shè)置4個(gè)施氮水平0、45、90和135 kg/hm²，分析其對(duì)紅花大金元煙葉游離氨基酸和蛋白質(zhì)含量的影響，并通過(guò)感官質(zhì)量對(duì)煙葉品質(zhì)進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果表明，煙葉內(nèi)組氨酸和天冬酰胺等含量隨施氮水平的提高而顯著增加，谷氨酰胺和精氨酸等含量以施氮90 kg/hm2處理最高，施氮135 kg/hm²時(shí)出現(xiàn)下降趨勢(shì)，賴(lài)氨酸含量則是隨施氨水平的增加而顯著降低；游離氨基酸總量和蛋白質(zhì)含量隨施氮水平的提高顯著增加，施氮135 kg/hm²最高可達(dá)9.617 mg/g和10.56%；感官評(píng)吸中煙葉的香氣質(zhì)和評(píng)吸總分以施氮90kg/hm²處理得分最高，不施氮處理最低。在本試驗(yàn)條件下，煙葉內(nèi)游離氨基酸的含量變化隨施氮水平的改變呈現(xiàn)出不一樣的特點(diǎn)，但游離氨基酸總量和蛋白質(zhì)含量隨施氦水平的提高顯著增加，施氮90 kg/hm²處理煙葉感官質(zhì)量最佳。
　　關(guān)鍵詞：氮索水平；紅花大金元；游離氨基酸；蛋白質(zhì)；感官質(zhì)量
　　中圖分類(lèi)號(hào)：S572.06 文章編號(hào)：1007-5119（2017）05-0050-06 DOI：10.13496/j.issn.1007-51 19.2017.05.009
　　煙草植株從土壤中吸收銨鹽或硝酸鹽，在煙草根系和綠葉中還原成氨，再經(jīng)同化作用形成各種氨基酸和蛋白質(zhì)等有機(jī)含氮化合物。蛋白質(zhì)和游離氨基酸作為煙葉中的主要含氮化合物對(duì)煙葉品質(zhì)和煙氣質(zhì)量具有重要影響。因此，圍繞氮素對(duì)煙葉氨基酸含量及煙葉品質(zhì)的影響研究，已成為國(guó)內(nèi)外煙草研究者關(guān)注的熱點(diǎn)。劉敬業(yè)等研究認(rèn)為氨基酸含量與施肥量呈正相關(guān)，增幅較大的為谷氨酸、天門(mén)冬氨酸和脯氨酸。史宏志等研究不同氮源肥料配比對(duì)河南煙葉氨基酸含量的影響發(fā)現(xiàn)，煙葉中總氨基酸含量與栽培時(shí)總施氮量和無(wú)機(jī)氮施用量呈顯著正相關(guān)關(guān)系。李常軍等對(duì)烤后煙葉主要含氮化合物之間的統(tǒng)計(jì)分析表明，總氮、煙堿、蛋白質(zhì)和氨基酸相互間極顯著相關(guān)。
　　通過(guò)調(diào)節(jié)氮素施用水平來(lái)改變煙葉中游離氨基酸和蛋白質(zhì)的含量，可以促進(jìn)煙葉化學(xué)成分協(xié)調(diào)，提高煙葉感官品質(zhì)。因此，本文研究了不同氮素水平下云南玉溪和大理紅花大金元（簡(jiǎn)稱(chēng)紅大）煙葉游離氨基酸和蛋白質(zhì)含量的變化規(guī)律，以及對(duì)煙葉感官評(píng)吸質(zhì)量的影響，旨在為云南紅大栽培中氮素的合理施用及煙葉品質(zhì)的提升提供理論指導(dǎo)。
　　1材料與方法
　　1.1試驗(yàn)區(qū)概況
　　試驗(yàn)于2013年5月初至8月底在紅大的主要種植區(qū)云南省玉溪市紅塔區(qū)春和鎮(zhèn)和大理州祥云縣禾甸鎮(zhèn)烤煙基地進(jìn)行。試驗(yàn)地點(diǎn)的氣候和土壤條件見(jiàn)表1-2。
　　1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)
　　試驗(yàn)設(shè)4個(gè)氮水平處理：N₀為不施氮肥；N₁為低氮處理（施氮量45 kg/hm²）；N₂為中等施氮處理（施氮量90kg/hm²）；N₃為高施氮處理（施氮量135 kg/hm²）。各處理3次重復(fù)，共計(jì)12個(gè)小區(qū)，小區(qū)面積120 m²，隨機(jī)區(qū)組排列�？緹熢耘嘁�(guī)格（行距×株距）為110 cm×60 cm。各處理施用磷肥（P₂O₅）90 kg/hm²，鉀肥（K₂O）225 kg/hm²。試驗(yàn)用氮肥為硝酸銨（含N 34%）、磷肥為過(guò)磷酸鈣（含P₂O₅ 18%）、鉀肥為硫酸鉀（K₂O 50%）。施肥方法為全部磷肥做基肥施用，氮肥和鉀肥的1/3做基肥，剩余的氮肥和鉀肥做追肥分別于烤煙移栽后15 d和30 d施用。試驗(yàn)過(guò)程中煙株的有效留葉數(shù)為18-20，田間管理按當(dāng)?shù)赝扑]的優(yōu)質(zhì)煙生產(chǎn)技術(shù)措施實(shí)施。
　　1.3測(cè)定項(xiàng)目及方法
　　1.3.1煙葉游離氨基酸和蛋白質(zhì)的測(cè)定 煙葉適熟后采收烘烤，每小區(qū)取C3F和C2F各2.0 kg混合進(jìn)行游離氨基酸和蛋白質(zhì)的測(cè)定及感官評(píng)吸。游離氨基酸含量采用PITC柱前衍生化的HPLC技術(shù)測(cè)定準(zhǔn)確稱(chēng)取過(guò)60目篩煙樣1.0g于100mL磨口三角瓶中，加入0.005 mol/L HCl溶液50 mL室溫下超聲萃取30 min，離心后取上清液，使用0.45gm水相濾膜過(guò)濾待測(cè)。Agilent 1200 HPLC（美國(guó)），色譜條件為色譜柱：Hypersil ODS-C18柱（4.6 inn]×100mm，0.45μm），衍生化試劑為2，4-二硝基氟苯，流動(dòng)相A：0.05 mol/L乙酸鈉緩沖溶液，流動(dòng)相B：V_乙腈：V_水=1：1，梯度洗脫，流速1.0mL/min，柱溫22℃，檢測(cè)波長(zhǎng)360nm。
　　煙葉蛋白質(zhì)含量的測(cè)定參照文獻(xiàn)進(jìn)行：準(zhǔn)確稱(chēng)取過(guò)40目篩煙樣0.3 g于250 mL三角瓶中，先用0.5%醋酸煮沸樣品15 min，抽濾后濾渣用0.5%醋酸洗滌，再將濾渣置于消化管中，加入0.1 g HgO、1.0gK₂SO₄和5mL濃硫酸消化，然后采用AA…連續(xù)流動(dòng)分析儀（英國(guó)Seal公司）測(cè)定。
　　1.3.2煙葉感官質(zhì)量評(píng)定 參照文獻(xiàn)進(jìn)行，取試驗(yàn)煙葉回潮后切絲，然后調(diào)節(jié)煙絲含水率到12.5%左右，卷制成卷煙后在規(guī)定的條件下調(diào)節(jié)24 h，按單料煙評(píng)吸基本要求進(jìn)行評(píng)吸。
　　1.4數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)分析
　　試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Microsoft Office Excel 2013和IBM Statistics SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行分析處理，不同施氮處理間煙葉化學(xué)成分的均值多重比較采用LSD法；變量間的相關(guān)關(guān)系分析采用Pearson相關(guān)統(tǒng)計(jì)方法。

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