中藥材農(nóng)藥殘留提方法對比分析

　　【摘要】目的：對比分析中藥材中農(nóng)藥殘留采取不同提取方法的有效性。方法：采取索氏提取、加速溶劑萃取以及超聲提取等方式提取中藥材中農(nóng)藥殘留，經(jīng)過凝膠滲透色譜、濃硫酸磺化以及弗羅里硅土柱凈化方式，得出相應的樣品，然后對比農(nóng)藥殘留含量。結果：凝膠滲透色譜相較于固相萃取、磺化法準確率較高。結論：ASE的提取率相對較高，檢測的結果也較為準確，并且操作自動，可以省時省力。
　　【關鍵詞】中藥材；農(nóng)藥殘留；超聲提取法
　　[中圖分類號]R473 [文獻標識碼]A [文章編號]2096-5249（2018）02-210-02
　　中藥多采用口服的方式，通過改善人體的內(nèi)環(huán)境提高人體抵抗疾病的能力，順其自然的治好疾病。相對于西藥來說，中藥的毒副作用更小一些，但中藥材在種植過程中，農(nóng)藥使用導致一定的殘留，對使用者造成一定危害。有研究[1]認為，中藥材農(nóng)藥殘留檢測方法比較多，很多檢測方式都是采取添加回收率的方式，對農(nóng)藥提取是否安全進行衡量。然而，添加農(nóng)藥與藥材自身吸收農(nóng)藥的狀態(tài)存在巨大差異，但添加的農(nóng)藥和藥材本身吸收的農(nóng)藥狀態(tài)差異很大，通過添加回收方式無法對藥物自身對農(nóng)藥吸收的情況進行準確反映。本次研究采用索氏提取、加速溶劑萃取以及超聲提取等方式提取中藥材中農(nóng)藥殘留，探究了中藥材中農(nóng)藥殘留采取不同提取方法的有效性，總結如下：
　　1.儀器、試藥與方法
　　1.1 儀器、試藥
　　儀器包含SHB-B型循環(huán)水式多用真空泵、GC-2氣相色譜儀——電子捕獲檢測器（GC-ECD）、HP-5石英毛細管柱（30m×0.32mm×0.25μm）、DB1701石英毛細管柱（30m×0.32mm×0.25μm）：DionexASE-350加速溶劑萃取儀、KH-3000plus凝膠滲透色譜儀、凈化柱、填料50gBio-BeadsTypeS-X3200-400；KX（GJ）100-1密封制樣粉碎機、CP214電子天平、SK5200LHC超聲波清洗器、RE-52AA旋轉蒸發(fā)儀等。
　　玄參、白術、黃芪；Florisil硅土柱、正己烷、無水硫酸鈉、濃硫酸、乙酸乙酷、丙酮、石油醚、乙睛。農(nóng)藥的標準品：六六六（BHC）3個異構體α-BHC、β-BHC、γ-BHC、六氯苯、五氯硝基苯、pp’-DDE、反式氯菊酯（trans-permethrin，批號80104，純度都高于99.0%。
　　1.2 方法
　　1.2.1 提取方法
　　將樣品在自然條件下陰干后粉碎，過0.24mm孔徑的樣品篩，待用。
　　加速溶劑萃�。簻蚀_稱取樣品1g、硅藻土1g（硅藻土起到分散劑的作用），混勻，置于10mL的萃取池中，待測。ASE系統(tǒng)壓力1500psi，溫度100℃，加熱時間5min，靜態(tài)萃取時間5min，沖洗體積為60%，氮吹60s，循環(huán)2次。提取液在旋轉蒸發(fā)儀40℃水浴中濃縮至近干，待凈化。
　　超聲提�。簻蚀_稱取1g樣品與1g無水硫酸鈉，混勻，置于100mL具塞三角瓶中，加入提取溶劑30mL，冰浴提取15min，將提取液過濾至100mL茄形瓶中，重復提取1次，合并提取液并在旋轉蒸發(fā)儀40℃水浴中濃縮至近干，待凈化。
　　索氏提�。簻蚀_稱取樣品10g與無水硫酸鈉1.0g，混勻，置于濾紙包中，放入索氏提取器中，加80mL提取溶劑（索氏提取器中30mL，100mL圓底燒瓶中50mL），65℃水浴提取30min，約回流6次，將提取液轉移至100mL茄形瓶中，在旋轉蒸發(fā)儀40℃水浴中濃縮至近干，待凈化。
　　1.2.2 凈化方法
　　磺化法指的是把濃縮后的殘渣用正己烷定量轉移至具塞刻度試管中，定容至5mL，再用移液槍加入1mL濃硫酸，渦旋1min，3000r/min離心10min，取上清液，進氣相色譜儀測定。
　　固相萃取法操作如下：將濃縮后的殘渣加1mL的正己烷進行溶解，將裝有1mL左右高度無水硫酸鈉的弗羅里硅土柱置于固定架上，先用10mL正己烷-乙酸乙醋（85：15）進行淋洗，當淋洗液近干時快速移入樣品濃縮液，用2mL淋洗液脫茄，轉入柱中，用50mL茄形瓶收集洗脫液20mL，在40℃水浴旋轉濃縮至近干。
　　凝膠滲透色譜是把濃縮后殘渣用乙酸乙醋-環(huán)己烷（1：1，V/V）定容至5mL，0.22μm濾膜過濾后，進行凝膠滲透色譜凈化，乙酸乙醋-環(huán)己烷（1：1，V/V）為流動相，流速5mL/min，玄參樣品收集11-14min流出物，白術收集11-16min流出物，黃芪樣品收集14-17min流出物，在40℃水浴中進行濃縮，加正己烷1mL溶解，待測。
　　1.2.3 色譜條件
　　HP-5彈性石英毛細管柱（30m×0.32mm，0.25μm），進樣口溫度250℃，不分流進樣。升溫程序：初始溫度120℃保持1min，以8℃/min速度升溫至150℃保持2min，以4℃/min速度升溫至270℃保持4min。檢測器溫度為300℃，流速為1mL/min，進樣量為1μL。
　　2.結果
　　檢測結果見表1。
　　3.討論
　　現(xiàn)階段，在對中藥材中農(nóng)藥殘留進行監(jiān)測時，主要采取回收率判斷檢測結果好壞。然而，基于添加農(nóng)藥會附著在藥材的表面，和藥材自然生長時所吸取農(nóng)藥不一樣，兩者提取出農(nóng)藥量也就存在差異[2]。本次研究中指出ASE的提取率相對較高，檢測的結果也較為準確，并且操作自動，可以省時省力。但是在實際檢測過程中，需要按照自身情況來設計方案與方法。
　　參考文獻：
　　[1]劉洪波.氣質聯(lián)用測定杭白術等3種中藥中5種擬除蟲菊醋類農(nóng)藥殘留[J].浙江農(nóng)林大學學報，2015，32（1）：110-115.
　　[2]何惠芳.氣相色譜技術檢測中藥農(nóng)藥殘留的應用體會[J].醫(yī)藥前沿，2014，23（18）：10-11.

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