離子色譜法測定煙葉中游離氨基酸

　　摘要：為了研究離子色譜法測定煙葉中游離氨基酸含量，以游離氨基酸測定總量為指標，考察了萃取所用的溶劑、溫度、時間以及料液比等因素對游離氨基酸測定量的影響。結(jié)果表明，煙草中游離氨基酸的最優(yōu)檢測條件為：萃取溶劑為0.1 mol/L鹽酸、萃取時間為30 min、萃取溫度為30 ℃、煙葉與鹽酸的比例為1∶40（w/v）。測定方法的氨基酸檢出限為2.76～22.36 ng/mL，定量限為9.57～102.13 ng/mL，試驗的RSD為1.26%～4.96%，氨基酸的加標回收率為83.51%～106.78%，說明該優(yōu)化方法可行，利用確定的最佳條件測定了國內(nèi)主產(chǎn)區(qū)的10種烤煙型煙葉。
　　關(guān)鍵詞：煙草;游離氨基酸;離子色譜;測定
　　中圖分類號：O656.3        文獻標識碼：A        文章編號：0439-8114（2015）23-6023-03
　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.23.058
　　Determination of Free Amino Acids in Tobacco by Ion Chromatography Method
　　LI Hui1，YUE Xian-ling1，LI Hao2，HOU Peng-juan2，ZHANG Jun-song2
　�。�1.Technology Center of Heilongjiang Tobacco Industry Co.，Ltd.， Harbin 150001， China;
　　2.College of Food and Bioengineering Zhengzhou University of Light Industry， Zhengzhou 450002， China）
　　Abstract： In order to study the effect of ion chromatography method for the determination of free amino acids in tobacco， the optimization of the experimental conditions were studied， the value of free amino acids used as a response value. The experimental results showed that the best experimental conditions were as follows： the extract solvent was 0.1 mol/L hydrochloric acid; the temperature of experiment was 30 ℃; the extract time was 30 min; the solid to liquid ratio was 1∶40（w/v）. The detection limit of the method was 2.76～22.36 ng/mL，limit of quantitation was 9.57～102.13 ng/mL， the method has high recovery（83.51%～106.78%）and good repeatability （RSD<5%）， these results demonstrate that this method is feasible. The contents of free amino acids in 10 flue-cured tobaccos were determined.
　　Key words：tobacco;free amino acids;ion chromatography;determination
　　游離氨基酸是煙草中的一類重要化合物，約占煙葉重量的0.5%～2.1%[1]，在煙草生長、烘烤、陳化、工藝加工以及燃燒的過程中參與化學反應，并生成許多種具有不同香味特征的化合物，與煙葉內(nèi)或外加的還原糖發(fā)生縮合以及縮合物的進一步降解，生成一系列的吡咯、吡嗪和呋喃類等堿性香味化合物，這些堿性香味成分對煙草的香氣、吸味等感官質(zhì)量產(chǎn)生顯著影響[2，3]。某些氨基酸也可以自身分解，生成具有香味的化合物，因此煙葉中游離氨基酸的種類數(shù)量以及煙葉中各種氨基酸的含量的多少與煙葉品質(zhì)的好壞有著重要的相關(guān)性[4，5]。
　　研究發(fā)現(xiàn)，煙葉中適量的氨基酸可有助于提高相應卷煙煙氣勁頭以及增加其煙氣的豐滿度，但是若煙葉中氨基酸含量過于偏高，會使相應卷煙煙氣產(chǎn)生過于辛辣的口感，并且味苦、刺激性強烈，含量過低則會使煙氣趨于平淡無味，豐滿程度變差，因此煙草中氨基酸含量的多少對其感官質(zhì)量有重要的影響[6-8]。為此利用離子色譜測定煙草中游離氨基酸，以期為卷煙工業(yè)合理利用煙葉原料提供科學依據(jù)。
　　1  材料與方法
　　1.1  材料與儀器
　　試驗所用煙葉均為黑龍江煙草工業(yè)有限責任公司技術(shù)中心提供;17種氨基酸標樣（>99%，百靈威公司）;無水醋酸鈉（>99.9%， Dionex公司）;氫氧化鈉和氨水（AR，中國醫(yī)藥集團上�；瘜W試劑公司）;37%鹽酸（ACROS公司）;SPE SCX 4 mL/200 mg強陽離子交換固相萃取小柱;0.45 μm水相濾膜（津騰）。
　　HZ-F185型旋轉(zhuǎn)恒溫震蕩器（太倉試驗設(shè)備廠）;ICS-5000+型分析型多功能離子色譜（美國戴安公司）;RE-52AA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）。
　　1.2  試驗方法

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