桑樹藥材各部位中芪類成分含量的比較及其相關(guān)性研究

　　[摘要] 目的：分析比較桑樹藥材各部位與主根根皮中芪類成分的含量，并對其相關(guān)性進行研究，為富含芪類桑樹品種選育過程中使主根繼續(xù)生長繁殖，而采用桑樹其他部位芪類成分含量估測主根根皮的芪類成分含量提供理論依據(jù)。方法：以桑樹中3個主要的芪類成分桑皮苷A、氧化白藜蘆醇、白藜蘆醇為指標，采用高效液相色譜法對桑樹藥材各部位中主要芪類成分含量進行測定，并對桑樹藥材各部位間及與主根根皮中的芪類成分含量進行相關(guān)與回歸分析。結(jié)果： 桑樹藥材各部位間所含3個芪類成分含量大部分顯著相關(guān)。在與主根根皮的關(guān)系中，桑樹藥材各部位所含氧化白藜蘆醇均與主根根皮中含量顯著相關(guān)；除了一年生枝條髓，各部位白藜蘆醇含量均與主根根皮中含量顯著相關(guān)；一年生枝條樹皮與側(cè)根所含桑皮苷A含量與主根根皮中含量顯著相關(guān)。相關(guān)與回歸分析顯示，桑樹藥材各部位與主根根皮之間的桑皮苷A、氧化白藜蘆醇、白藜蘆醇呈顯著的正相關(guān)。結(jié)論：桑樹藥材各部位中的芪類成分含量分布大部分顯著相關(guān)，在富含芪類桑樹品種選育過程中為了使主根繼續(xù)生長繁殖，可以采用桑樹其他部位芪類成分含量估測主根根皮的芪類成分含量。
　　[關(guān)鍵詞]桑樹；部位；芪類成分；高效液相色譜
　　桑白皮Mori Cortex為桑科桑屬植物Morus alba L.的干燥根皮。桑白皮性甘、寒，歸肺經(jīng)，具有利水消腫、瀉肺平喘功能^[1]，是常用中藥材之一。研究表明，桑白皮中富含氧化白藜蘆醇、桑皮苷、白藜蘆醇等二苯乙烯芪類物質(zhì)^[2-5]，此類物質(zhì)具有多種生物活性（絡(luò)氨酸酶抑制劑^[6]，可以抑制黑色素的生成，抗炎^[7]、抗皰疹^[8]、抗病毒^[9]、抗氧化^[10]、保護神經(jīng)以及在腦缺血發(fā)生時抑制細胞凋亡^[11]），而備受關(guān)注。我國是蠶桑生產(chǎn)的發(fā)源地，擁有極其豐富的桑樹種質(zhì)資源，分屬于15個桑種和4個變種^[12-13]。因而，富含芪類藥用桑優(yōu)良品種選育十分必要。在富含芪類藥用桑優(yōu)良品種挑選過程中， 既要篩選出優(yōu)良種質(zhì)， 同時還要使種質(zhì)繼續(xù)生長繁殖。為此， 本文作者提出了用桑樹其他各部位芪類成分含量來估測主根根皮芪類成分含量的解決辦法。本實驗采用高效液相色譜法^[14]對桑樹的一年生枝條木質(zhì)部、一年生枝條樹皮、一年生枝條髓、側(cè)根、主根木質(zhì)部、主根根皮中3個主要的芪類成分桑皮苷、氧化白藜蘆醇、白藜蘆醇的含量進行測定，并對桑樹不同部位與主根根皮的芪類成分含量進行了相關(guān)與回歸分析， 旨在為用桑樹其他部位芪類成分含量估測桑樹主根根皮的芪類成分含量提供理論依據(jù)。
　　1材料
　　桑樹樣品于2011年10月下旬采自湖南省蠶�？茖W研究所桑樹資源圃，采樣同一品種桑樹六年生，10株，每株分別采一年生枝條木質(zhì)部、一年生枝條樹皮、一年生枝條髓、側(cè)根、主根木質(zhì)部、主根根皮。樣品自然陰干，粉碎，過40目篩，備用。
　　氧化白藜蘆醇、桑皮苷A、白藜蘆醇對照品（天津市奎青商貿(mào)有限公司）；乙腈（HPLC級，美國天地公司）；甲酸（AR級，天津市富宇精密化工儀器有限公司）；甲醇（AR級，天津市科密歐化學試劑有限公司）。
　　AE240 型電子天平 （Mettler Toledo 公司）；安捷倫1200高效液相色譜儀，安捷倫G1314B紫外檢測器，Hypersil BDS C18柱（4.6 mm×200 mm，5 μm，大連依利特公司）；FW-135粉碎機（天津市泰斯特公司）。
　　桑樹芪類成分測定樣品提取液的制備：精密稱取過40目篩桑樣品粉1.0 g，置50 mL棕色量瓶中，加入60%甲醇（分析純）25 mL，超聲提取2次，每次40 min，合并2次的提取液，再定容于50 mL量瓶，得桑樣品提取液。取桑樣品提取液5 mL，過0.45 μm微孔濾膜，棄去初濾液，續(xù)濾液置EP管內(nèi)，待測。
　　2方法與結(jié)果
　　2.1樣品含量測定 精密稱取桑樹藥材各部位的粉末，按照1項方法制備樣品提取液，按照本實驗室高效液相色譜法^[14]檢測含量。流動相為乙腈（A）-1.0%甲酸水溶液（B），梯度程序為0～25 min，乙腈（A）5%～30%，1.0%甲酸水溶液（B） 95%～70%，檢測波長320 nm，柱溫40 ℃，進樣體積10 μL，流速1.0 mL·min^-1。每個樣品重復(fù)測定3次。記錄各樣品中桑皮苷A、氧化白藜蘆醇、白藜蘆醇的色譜峰面積，代入線性方程，計算各不同樣品中3個芪類成分的含量見表1。
　　2.2統(tǒng)計方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件對桑樹藥材各部位的桑皮苷A、氧化白藜蘆醇、白藜蘆醇含量顯著性差異及其相關(guān)性進行分析。
　　2.3桑樹藥材各部位之間及與主根根皮芪類成分含量的相關(guān)性分析 桑樹一年生枝條木質(zhì)部、一年生枝條樹皮、一年生枝條髓、側(cè)根、主根木質(zhì)部、主根根皮中3個主要的芪類成分含量相關(guān)性分析見表2～4。以桑樹藥材各部位含量為自變量（X），主根根皮含量為因變量（Y），對桑樹藥材中各部位與主根根皮芪類成分的含量進行相關(guān)與逐步回歸分析，結(jié)果見表5。
　　由表1可知，桑皮苷A、氧化白藜蘆醇、白藜蘆醇分別在主根根皮、側(cè)根與主根木質(zhì)部含量最高。由表2可知，桑樹藥材一年生枝條樹皮與側(cè)根、主根根皮，側(cè)根與主根根皮中桑皮苷A含量極顯著相關(guān)。由表3可知，桑樹藥材一年生枝條木質(zhì)部與主根根皮，一年生枝條髓與主根木質(zhì)部，主根木質(zhì)部與主根根皮氧化白藜蘆醇含量顯著相關(guān)。桑樹藥材一年生枝條木質(zhì)部與一年生枝條髓，一年生枝條樹皮與一年生枝條髓、側(cè)根、主根木質(zhì)部、主根根皮，一年生枝條髓與側(cè)根、主根根皮，側(cè)根與主根木質(zhì)部、主根根皮中氧化白藜蘆醇含量極顯著相關(guān)。由表4可知，桑樹藥材一年生枝條木質(zhì)部與一年生枝條樹皮、側(cè)根、主根根皮，一年生枝條樹皮與側(cè)根、主根根皮，側(cè)根與主根根皮白藜蘆醇含量極顯著相關(guān)。結(jié)果表明，桑樹藥材各部位所含3個芪類成分含量大部分顯著相關(guān)。在與主根根皮的關(guān)系中，桑樹藥材各部位所含氧化白藜蘆醇均與主根根皮中含量顯著相關(guān)；除了一年生枝條髓，各部位白藜蘆醇含量均與主根根皮中含量顯著相關(guān)；一年生枝條樹皮與側(cè)根所含桑皮苷A含量與主根根皮中含量顯著相關(guān)。

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