以提升品質(zhì)為目標的中藥材靈芝袋料栽培技術初探

　　摘要[目的]研究中藥材靈芝袋料栽培技術，以提升靈芝藥材品質(zhì)。[方法]以靈芝生物轉化率、多糖含量和三萜含量為指標，采用混料設計優(yōu)化袋料栽培靈芝主料配方，采用單因素試驗優(yōu)化石灰添加量和基質(zhì)顆粒度。[結果]當純棉籽殼為主料、石灰添加量為4%、基質(zhì)顆粒度大于1 cm時，袋料栽培靈芝生物轉化率最高；當雜木屑用量25%、棉籽殼用量25%、玉米芯用量50%、石灰添加量為1%、基質(zhì)顆粒度大于1 cm時，多糖含量最高；當雜木屑用量50%、棉籽殼用量50%、石灰添加量為2%、基質(zhì)顆粒度小于0.5 cm時，三萜含量最高。[結論]栽培基質(zhì)對袋料栽培靈芝品質(zhì)影響較大，可通過主料配方、石灰添加量及基質(zhì)顆粒度控制袋料靈芝產(chǎn)量和品質(zhì)。
　　關鍵詞靈芝（GANODERMA）；袋料栽培；主料配方；石灰添加量；基質(zhì)顆粒度
　　中圖分類號S567.3+1文獻標識碼A文章編號0517-6611（2014）04-00981-02
　　基金項目菌類藥材研究與開發(fā)四川省科技創(chuàng)新團隊（2011JTD0021）；四川省十二五育種攻關項目“菌類藥材優(yōu)質(zhì)種質(zhì)資源的收集及新材料的選育”（2011NZ0098—12—04）；國家農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術體系藥用菌栽培崗位建設項目（農(nóng)科教發(fā)[2007]12號）；四川省公益性科研院所基本科研項目“袋料靈芝營養(yǎng)代謝-藥效成分時空關聯(lián)模式的研究”；四川省十二五育種攻關項目“菌類藥材優(yōu)質(zhì)種質(zhì)資源的收集及新材料的選育”（2011NZ0098—12—04）；四川省重大科技計劃項目“食藥用菌現(xiàn)代產(chǎn)業(yè)鏈關鍵技術研究集成與產(chǎn)業(yè)化示范（2012 NZ0003）； 四川省農(nóng)業(yè)微生物平臺項目。
　　作者簡介魏�。�1982-），男，四川成都人，助理研究員，博士，從事藥用真菌研究。*通訊作者，副研究員，博士，從事藥用真菌研究。
　　靈芝袋料栽培具有產(chǎn)量高、周期短、原料來源廣泛等優(yōu)點[1]，已逐步取代椴木栽培成為靈芝人工栽培技術的研究熱點。但是目前關于靈芝袋料栽培技術的研究主要集中在產(chǎn)量和農(nóng)藝性狀上面[2-3]，針對靈芝內(nèi)在品質(zhì)的栽培技術研究鮮有報道。作為傳統(tǒng)的名貴中藥材，靈芝（GANODERMA）在我國有著悠久的藥用歷史，收錄于《中華人民共和國藥典》（2010版），主要的藥效成分為靈芝多糖和三萜，這些成分是評價靈芝品質(zhì)的主要標準。筆者以提升靈芝品質(zhì)為目標，從靈芝栽培基質(zhì)的主料配方、石灰添加量及基質(zhì)顆粒度入手，研究靈芝袋料栽培技術，旨在為靈芝建立“中藥材生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范”（GAP）提供試驗基礎。
　　1 材料與方法
　　1.1材料
　　1.1.1 研究對象。靈芝（Ganoderma lucidum （Leyss.ex Fr.） Karst），由四川省中醫(yī)藥科學院細胞與分子生物學實驗室分離保存。
　　1.1.2 主要試劑。雜木屑、棉籽殼、玉米芯、石膏和石灰粉等，均購自當?shù)剞r(nóng)貿(mào)市場；葡萄糖、蒽酮、濃硫酸、香草醛、齊墩果酸、無水乙醇、NaHCO3、冰醋酸和氯仿，均為分析純，市售。
　　1.2方法
　　1.2.1 主料配方的優(yōu)化。主料配方優(yōu)化采用混料設計法，主料由雜木屑、棉籽殼和玉米芯組成，設定各主料占所有主料的質(zhì)量百分比為X1’，X2’和X3’，均滿足基本約束條件：0≤X1’≤1；0≤X2’≤1；0≤X3’≤1；X1’+X2’+ X3’=1，主料占配方的90%，則在實際生產(chǎn)過程中主料的添加量為X1=0.9×X1’；X2=0.9×X2’；X3=0.9×X3’。輔料占10%，由8%麩皮、1%石膏和1%石灰組成�？紤]到各主料培養(yǎng)基對觀測指標存在協(xié)同交互作用，試驗采用單純形重心設計，并通過軸點增強設計選取試驗點進行混料設計，共選取10個觀察試驗點，具體設計見表1。
　　1.2.2 石灰添加量的優(yōu)化�；�質(zhì)配方采用15%雜木屑、60%棉籽殼、15%玉米芯、8%麩皮、1%石膏，裝袋前按比例分別添加1%、2%、3%和4%生石灰，以不加石灰栽培為對照（CK）。
　　1.2.3 基質(zhì)顆粒度的優(yōu)化�；�質(zhì)配方采用15%雜木屑、60%棉籽殼、15%玉米芯、9%麥麩、石膏1%和1%石灰，以玉米芯和木屑顆粒直徑為研究對象，設定處理1為顆粒直徑≤0.5 cm，處理2為0.5 cm≤顆粒直徑≤1 cm，處理3為顆粒直徑≥1 cm。
　　1.2.4 栽培方法。選用22 cm×42 cm×0.002 5 cm的聚丙烯袋，每個配方20袋，于121 ℃高壓滅菌2.5 h，冷卻至室溫后接種，在25 ℃、空氣相對濕度70%、避光培養(yǎng)至菌絲長滿袋，菌絲滿袋后移入出菇棚出芝。出菇棚溫度為16～24 ℃，濕度為65%～80%。
　　1.2.5 指標的檢測。（1）靈芝生物轉化率。采摘第1潮靈芝子實體，記錄每袋收獲干芝重量，計算生物轉化率，生物轉化率（%）=干芝重量（g）/每袋干重（g）×100。（2）多糖含量測定[4]。以葡萄糖作為標準，采用硫酸-蒽酮法測定。（3）三萜含量測定[5]。以齊墩果酸作為標準，采用香草醛-高氯酸法測定。
　　1.2.6 數(shù)據(jù)分析�；炝显O計試驗根據(jù)結果建立回歸方程，求觀測指標Y與影響因子X的數(shù)學模型，計算線性回歸方程，應用Minitab 15軟件進行數(shù)據(jù)處理。
　　2結果與分析
　　2.1主料配方的優(yōu)化 采用軟件對試驗數(shù)據(jù)進行回歸分析，并采用逐步法和后退法減少不顯著變量，對回歸方程進行顯著性檢驗（F檢驗）。當P<0.01時，回歸模型在統(tǒng)計學上才有意義。根據(jù)上述條件和結果，建立生物轉化率Y與主料各成分X’之間關系的數(shù)學模型為：Y=3.69 X1’+6.78 X2’+4.39 X3’，R2=0.799 9，說明試驗數(shù)據(jù)的變異性基本可以用此回歸模型來解釋。將多糖、三萜與各主料各成分X’關系的數(shù)學模型經(jīng)過顯著性檢驗可知，P>0.01，說明2個模型的擬合度差，不描述多糖含量和配方之間的關系，但是通過優(yōu)化結果可知，配方7的多糖含量最高；配方2的三萜含量最高（表2）。

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