三七藥材霉變菌的分離培養(yǎng)及鑒定

　　摘要 為研究三七藥材在貯藏期間的霉變問題，對(duì)收集到的12份霉變?nèi)�七進(jìn)行分離、純化、鑒定。結(jié)果表明，從霉變?nèi)�七上分離出14種霉菌種類，其霉菌菌落營養(yǎng)生長的最適溫度都為25 ℃，不同的霉變菌落生長速度有差異；通過形態(tài)學(xué)鑒定為黃曲霉柱頭變種、肇慶曲霉、多育曲霉、溜曲霉、兩形頭曲霉、毒曲霉、合陽曲霉、寄生曲霉、粒落曲霉、聚多曲霉、炭黑曲霉、日本曲霉原變種、米曲霉舒展變種和塔賓曲霉等。
　　關(guān)鍵詞 三七；霉變菌；分離；鑒定
　　中圖分類號(hào) S567.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-5739（2017）20-0066-02
　　Isolation and Identification of Mold in Panax notoginseng
　　WANG Bing-yan 1 SUN Yu-qin 1 YANG Li 1 ZHU Lin 1 ZHAO Ai 1 GAO Ming-hai 2 WANG Chao-liang 1 *
　�。�1 Sanqi Research Institute，Wenshan University，Wenshan Yunnan 663000； 2 Wenshan Huaxin Sanqi Co.，LTD）
　　Abstract In order to in study the mildew of Panax notoginseng in the storage stage，12 samples were separated，purified and identified. The results showed that 14 kinds of mold were separated，the optimum temperature for all colonies growth was 25 ℃，there are differences in growth rate among different kinds of colonies. Based on the morphology identification，the species of mold in Panax notoginseng were Aspergillus flavus var. columnaris，A. zhaoqingensis，A. proliferans，A. tamarii，A. janus，A. toxicarius，A. heyangensis，A. parasiticus，A. granulosus，A. sydowii，A. carbonarius，A. japonicas var. japonicas，A. oryzae var. effuses and A. tubingensis.
　　Key words Panax notoginseng；mold；isolation；identification
　　三七為五加科人參屬植物，以干燥根及根莖入藥[1]。近年來，隨著三七產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展，其種植面積和產(chǎn)量均占全國的98%以上，是云南獨(dú)具特色的生物資源[2]。長期以來，由于貯藏設(shè)施落后，管理粗放，絕大多數(shù)都分散在民宅貯藏，導(dǎo)致三七藥材在貯藏期間常常遭受多種霉菌的侵害而發(fā)生霉變。
　　現(xiàn)階段由于三七藥材的貯藏規(guī)模和貯藏?cái)?shù)量越來越大，為深入探索三七藥材貯藏期引起的霉變和防止霉變措施已成為當(dāng)前亟需解決的課題。目前，國內(nèi)研究絕大多數(shù)都集中在栽培技術(shù)及初加工等方面，而對(duì)三七藥材貯藏期的霉變研究相對(duì)比較滯后，尚未有這方面的報(bào)道。
　　為此，在三七產(chǎn)區(qū)收集了12份霉變?nèi)�七進(jìn)行分離培養(yǎng)及鑒定，以期為三七藥材的科學(xué)合理貯藏及防止霉變提供科學(xué)依據(jù)。
　　1 材料與方法
　　1.1 試驗(yàn)材料
　　供試材料：采自于主產(chǎn)區(qū)貯藏在農(nóng)戶、三七交易市場、企業(yè)倉庫內(nèi)發(fā)生霉變的三七藥材。
　　供試培養(yǎng)基：供試基礎(chǔ)培養(yǎng)基為馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）和沙氏培養(yǎng)基。
　　1.2 試驗(yàn)方法
　　1.2.1 霉變?nèi)�七水分含量測(cè)定。按GB/T14769的方法測(cè)定水分。
　　1.2.2 霉變菌的分離培養(yǎng)及菌落形態(tài)觀察。無菌條件下用解剖針挑取三七藥材上的少許霉菌接種到培養(yǎng)基上，置于培養(yǎng)箱中25 ℃恒溫培養(yǎng)，2～3 d霉菌長出菌落后，挑取菌落邊緣的少許菌絲移入培養(yǎng)基上分離純化菌種，觀察記錄霉變菌落的生長及形態(tài)。
　　1.2.3 霉變菌的鑒定。根據(jù)霉變菌落、分生孢子梗和分生孢子形態(tài)觀察結(jié)果，參考《常見與常用真菌》[2]和《真菌鑒定手冊(cè)》[3]等文獻(xiàn)資料進(jìn)行霉變菌鑒定。
　　2 結(jié)果與分析
　　2.1 三七藥材貯藏中霉變發(fā)生情況
　　對(duì)三七交易市場、企業(yè)倉庫、民宅等區(qū)域進(jìn)行調(diào)查，結(jié)果表明，所有區(qū)域內(nèi)的三七藥材在貯藏期間均有少量不同程度的霉變發(fā)生；通過對(duì)霉變?nèi)�七水分含量測(cè)定，其三七藥材內(nèi)的水分含量均超過15%，有的水分含量甚至超過30%，超過了國家藥典規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)。說明水分含量過高是導(dǎo)致三七藥材產(chǎn)生霉變的主要因素之一。
　　2.2 霉變菌的分離培養(yǎng)及菌落形態(tài)觀察
　　室內(nèi)分離培養(yǎng)及菌落形態(tài)觀察結(jié)果表明，霉變菌落營養(yǎng)生長的最適溫度都為25 ℃，不同的霉變菌生長速度有差異。黃曲霉柱頭變種菌落在查氏瓊脂上12 d直徑57～65 mm；肇慶曲霉菌落在查氏瓊脂上7 d直徑60 mm，12～14 d直徑65 mm；多育曲霉菌落在查氏瓊脂上10～14 d直徑9～15 mm；溜曲霉菌落在查氏瓊脂上7 d直徑37～55 mm，10～14 d直徑50～60 mm；兩形頭曲霉菌落在查氏瓊脂上生長較慢，7 d直徑10～12 mm，12～14 d直徑25 mm；毒曲霉菌落在查氏瓊脂上7 d直徑50～60 mm，12～14 d直徑55～65 mm；合陽曲霉菌落在查氏瓊脂上生長較慢，7 d直徑12～17 mm，12～14 d直徑27～30 mm，粒落曲霉菌落在查氏瓊脂上7 d直徑30 mm，10～14 d直徑45～48 mm；聚多曲霉菌落在查氏瓊脂上7 d直徑約22 mm，10～12 d直徑25～40 mm；炭黑曲霉菌落在查氏瓊脂上生長迅速，7 d直徑40～60 mm；日本曲霉原變種菌落在查氏瓊脂上生長迅速，10 d直徑60～70 mm，少數(shù)菌株在50 mm以下；米曲霉舒展變種菌落在查氏瓊脂上7 d直徑30～35 mm，10～12 d長滿全皿；塔賓曲霉菌落在查氏瓊脂上生長迅速，7 d直徑50～75 mm。

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