高效液相色譜法同時測定人參藥材中的6種人參皂苷含量
發(fā)布時間:2019-08-30 來源: 感悟愛情 點(diǎn)擊:
摘 要 目的:參照全球主要國家藥典的相關(guān)內(nèi)容,應(yīng)用高效液相色譜法建立更趨簡便、實(shí)用的人參皂苷含量測定方法。方法:采用ZORBAX Eclipse Plus C18色譜柱(4.6 mm×250 mm, 5.0 μm);流動相為0.025%磷酸溶液-乙腈,梯度洗脫;流速0.9 ml/min;檢測波長203 nm。對10批市售人參藥材中的6種人參皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rb2和Rd的含量進(jìn)行測定。結(jié)果:可同時測定6種人參皂苷含量。10批市售人參藥材中的6種人參皂苷含量的差異較大。結(jié)論:本方法專屬性強(qiáng),且測定結(jié)果準(zhǔn)確、可靠,可用作人參藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中人參皂苷含量的測定方法。
關(guān)鍵詞 人參 人參皂苷 高效液相色譜法 含量測定
中圖分類號:R927.2; R284.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號:1006-1533(2018)13-0072-04
SHANG Xiaohui**, ZHU Ya’nan, YE Guan***
(Central Research Institute, Shanghai Pharmaceuticals Holding Co., Ltd., Shanghai 201203, China)
ABSTRACT Objective: To establish an HPLC method for the determination of six ginsenosides on the basis of ChP 2015, USP38-NF33, EP8.0, BP 2013 and JP17. Methods: The contents of six ginsenosides in ten samples sold in market were determined by HPLC on a ZORBAX Eclipse Plus C18 column (4.6 mm × 250 mm, 5.0 mm) with a mobile phase of acetonitrile-0.025% of phosphoric acid solution (adjusted to pH 2 with phosphoric acid) at the flow rate of 0.9 ml/min and the detected UV wavelength of 203 nm. Results: The contents of six ginsenosides including Rg1, Re, Rf, Rb1, Rb2 and Rd in the ten samples could be simultaneously determined and there were significant differences among them. Conclusion: This method is simple, rapid and repeatable with good specificity, so it can be used for quality control of Panax ginseng.
KEY WORDS Panax ginseng; ginsenosides; HPLC; content determination
人參(Panax ginseng C. A. Mey.)為五加科植物人參的干燥的根和根莖,具有“百草之王”的美譽(yù),具有補(bǔ)益脾肺、生津養(yǎng)血、安神益智等多種功效[1],多用于大補(bǔ)元?dú)狻,F(xiàn)代藥理研究表明,人參由于其多成分、多靶點(diǎn)的作用,具有改善心血管循環(huán)、提高免疫力、延緩衰老和抗腫瘤等多種藥理活性[2-5]。
人參具有較高的保健、藥用價值,在全球范圍內(nèi)得到了廣泛應(yīng)用。目前,全球主要國家藥典中均收載有人參藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),且多以人參皂苷Rg1、Rb1和Re的含量為指標(biāo)進(jìn)行質(zhì)量控制。
為了更好地控制人參藥材質(zhì)量,筆者等在參照各主要國家藥典相關(guān)內(nèi)容、特別是《2015美國藥典-國家處方集》中西洋參質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上,應(yīng)用高效液相色譜法(high performance liquid chromatography, HPLC)建立了可同時測定人參藥材中6種主要人參皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rb2和Rd含量的新方法,為人參藥材企業(yè)內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)的建立提供了依據(jù)。
1 儀器與試藥
Agilent 1260高效液相色譜系統(tǒng)(美國Agilent公司生產(chǎn));乙腈(色譜純)、磷酸(分析純)、水(超純水)。
10批市售人參藥材(經(jīng)筆者之一葉冠鑒定為人參的干燥根,樣品保存在筆者所在研究院的樣本庫中)。
對照品人參皂苷Rg1(批號:110703-201230)、Re(批號:110754-201525)、Rf(批號:111719-201505)、Rb1(批號:110704-201424)、Rb2(批號:111715-201203)和Rd(批號:111818-201302)均購自中國食品藥品檢定研究院。
2 方法及結(jié)果
2.1 對照品溶液制備
精密稱取適量人參皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rb2和Rd,甲醇定容后得濃度分別為2 620、2 250、1 200、3 340、1 610和1 420 μg/ml的對照品溶液,備用。
2.2 供試品溶液制備
方法1:取供試品粉末(過4號篩)約3 g,精密稱定后溶于150 ml三氯甲烷中,采用索氏提取法加熱回流3 h,棄三氯甲烷液,殘渣待溶劑揮發(fā)后移入250 ml錐形瓶中,加150 ml水飽和正丁醇,超聲處理90 min,過濾。取濾液125 ml,蒸干,殘渣以甲醇溶解并移至25 ml量瓶中,定容,搖勻,過濾,即得供試品溶液。
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