裸花紫珠藥材的指紋圖譜研究

　　【摘 要】建立海南裸花紫珠HPLC指紋圖譜，為其真?zhèn)舞b別和質(zhì)量控制提供依據(jù)。方法： HPLC色譜條件： Thermo Acclaim TM 120 C18 5μm 120A（250 mm×4.60mm）色譜柱，以乙腈-0.1%甲酸為流動相梯度洗脫，流速1.0ml/min，柱溫：35℃，檢測波長332nm，進樣量：10μl。結果：以16批裸花紫珠樣品的11個峰為共有峰評價指標，建立裸花紫珠的HPLC指紋圖譜測定方法，相似度較好。結論：該方法可用于該藥材的鑒別及質(zhì)量控制。
　　【關鍵詞】 裸花紫珠；指紋圖譜
　　【Abstract】Objective：To establish HPLC fingerprint method for the quality evaluation and discrimination of Callicarpa nudiflora. Methods ： The chromatographic fingerprint of 16 samples was determined by injecting 10 μl of the sample solution each time om a reversed phase Thermo Acclaim TM 120 C18 column with the gradient elution solvent system composed of 0.1% Formic acid solution and acetonitrile . The flow rate was 1.0 ml/min ，the column temperature was 35 ℃ and the detection wavelength was set at 332nm.Results： The HPLC fingerprint of Callicarpa nudiflora was set up， which included 11 common peaks，and the similarities of 16 samples were well . Conclusion： The method which can be used for discrimination and the quality control of Callicarpa nudiflora .
　　【Key Words】Callicarpa nudiflora； HPLC fingerprint
　　裸花紫珠為馬鞭草科植物裸花紫珠Callicarpa nudiflora Hook.et Arn.的干燥葉和帶葉嫩枝，別名為趕風柴、節(jié)節(jié)紅、大斑鳩米、賊仔葉。全年均可采收，為海南省常用的中草藥，有止血止痛、散瘀消腫、祛風祛濕的功能，可治創(chuàng)傷出血、嘔血、咳血、消化道出血、把牙出血、跌打損傷、風濕痹痛等癥�！吨兴幋筠o典》認為該種是《嶺南采藥錄》所載的趕風柴，《中國藥典》1977年版一部以裸花紫珠為名收載，以后各版藥典均未收載。[1]《中國藥典》2015年版一部收載了以裸花紫珠為原料的裸花紫珠片及裸花紫珠膠囊。裸花紫珠屬馬鞭草科紫珠屬，紫珠屬植物要用較多，其中《中國藥典》2015年版一部收載了該屬植物紫珠葉、廣東紫珠、大葉紫珠，裸花紫珠該品種從名稱、來源和應用上存在混亂的現(xiàn)象。[2]為了更好地鑒別和控制裸花紫珠的質(zhì)量、保障其制劑質(zhì)量可控，本試驗采用HPLC法，建立裸花紫珠的指紋圖譜[3]。
　　1 材料和儀器
　　1.1試藥
　　甲醇（色譜純 TEDIA公司），甲醇（分析純 廣州牌化學試劑廠），乙腈（色譜純 TEDIA公司），磷酸（色譜純 TEDIA公司），超純水（Synergy? UV制備）。
　　咖啡酸（購自購自中國藥品生物制品檢定所，批號110885-200102），連翹酯苷B（購自購自中國藥品生物制品檢定所，批號111811-201102），毛蕊花糖苷（購自成都克洛馬生物科技有限公司，批號20140404），木犀草苷（購自中國藥品生物制品檢定所，批號111752-201609），異毛蕊花糖苷（購自成都克洛馬生物科技有限公司，批號20140404）
　　樣品裸花紫珠及批次詳見表1 裸花紫珠樣品及批號
　　1.2儀器
　　高效液相色譜儀：Ultimate 3000 analysis高效液相色譜儀，Ultimate 3000 analytical高效液相色譜儀，Waters E2695高效液相色譜儀；超純水器：Synergy? UV；超聲波清洗器：上海科導超聲儀器有限公司，SK7200型。
　　2 方法與結果
　　2.1色譜條件
　　流動相：乙腈-0.1%甲酸磷酸梯度洗脫（詳見表2流動相梯度）；流速：1ml/min；柱溫：35℃；檢測波長：332nm。進樣量：10?l。
　　2.2標準溶液的制備
　　精密稱取咖啡酸標準品、連翹酯苷B、木犀草苷標準品、毛蕊花糖苷標準品、異毛蕊花糖苷標準品，分別于用70%甲醇溶解為標準液。
　　2.3供試品溶液的制備
　　將裸花紫珠藥材粉碎，精密稱取粉末約0.5g，置于錐形瓶中，精密加入70%甲醇25ml，密塞，稱定重量，回流提取1小時，放冷，再稱定重量，用70%甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
　　2.4指紋圖譜共有峰的標定
　　根據(jù)不同批次的裸花紫珠供試品HPLC色譜圖，共確定共有峰11個，其中1號為咖啡酸（9.1min），5號為連翹酯苷B（21.2min），7號為木犀草苷（26.5min），8號為毛蕊花糖苷（30.3min），9號為異毛蕊花糖苷（42.8min）。HPLC指紋圖譜共有峰標定見圖1～6。
　　2.5指紋圖譜的相似度評價
　　取16批裸花紫珠藥材按照“2.3”項下方法制備供試品溶液，進行測定，測得指紋圖譜導入“中藥指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)”（2012.130723版本），生成對照指紋圖譜。不同批次裸花紫珠指紋圖譜相似度見表3。從其相似度可以看出不同批次樣品該11個成分表現(xiàn)高度相似。
　　3 討論
　　本文采用HPLC梯度洗脫的方法對了16批不同批次的裸花紫珠藥材進行了指紋圖譜研究會，建立裸花紫珠HPLC指紋圖譜，并確定了其中的5個共有峰分別為咖啡酸、連翹酯苷B、木犀草苷、毛蕊花糖苷、異毛蕊花糖苷。裸花紫珠中的成分主要有黃酮類、萜類、揮發(fā)油和酚類等，本文共有峰含酚類及黃酮類成分，具有較好的代表性。
　　參考文獻
　　[1]海南省食品藥品監(jiān)督管理局.海南省中藥材標準[s].海口：南海出版社，2011：147～154.
　　[2] 國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典[s].一部.北京：中國醫(yī)藥科技出版社.
　　[3]馬思瑤，盛琳，關薇薇等.[J]海南裸花紫珠高效液相色譜法指紋圖譜研究.中藥材.2014.37（3）：404～408.
　　作者簡介：唐艷麗（1983），女（漢族），學士學位海南省藥品檢驗所從事中藥檢驗研究工作

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