中藥材GAP體系下白芨組織培養(yǎng)與栽植技術(shù)

　　[摘 要] 白芨GAP技術(shù)不僅能繼承發(fā)揚(yáng)傳統(tǒng)的種植、養(yǎng)殖技術(shù)和經(jīng)驗(yàn)，而且可使按規(guī)范生產(chǎn)出的產(chǎn)品達(dá)到“優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)、穩(wěn)定、可控”的要求，縮小與國(guó)外發(fā)達(dá)國(guó)家之間的差距。其中白芨組織培養(yǎng)是白芨GAP栽培的前提，基于此，本文簡(jiǎn)要介紹白芨組織培養(yǎng)技術(shù)、白芨組培苗GAP栽培技術(shù)要點(diǎn)，以供參考。
　　[關(guān)鍵詞] 白芨；GAP技術(shù)；組織培養(yǎng)；栽培
　　[中圖分類號(hào)] S567.239 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1674-7909（2018）08-100-3
　　1 白芨形態(tài)特征與作用
　　白芨[Bletilla striata（Thunb.）Reichb.f.]是蘭科白芨屬多年生草本植物，株高33～50 cm。肉質(zhì)塊莖，乳白色，具1～3叉呈菱角狀；根系為須根，常并生；總狀花序，常有花2～7朵，花為淡紫紅色，不整齊；蒴果呈柱狀，外具縱棱，兩端微尖；種子極小，多數(shù)。花期5—7月，果期8—9月。白芨有2種生態(tài)類型，一種花白色稍黃，葉條狀披針形，為狹葉白芨。另一種為紫花白芨，紫花白芨又有大種白芨、小種白芨之分，其中以大種白芨塊莖產(chǎn)量較高[1]。
　　白芨是一種重要的傳統(tǒng)中藥，主要分布在云南、貴州等省區(qū)。此外，安徽、江西等省區(qū)也有少量分布。幾乎遍布于云南省海拔1 600～2 600 m的林下、溝谷巖縫中、潮濕山坡與巖石上，喜溫暖，耐陰性強(qiáng)。藥用假鱗莖，10月莖葉黃枯時(shí)采收。性微寒，味苦，用于治療肺傷咳血、外傷出血、潰瘍疼痛等�！侗静菥V目》載：“氣味苦辛，無(wú)毒。主治癰瘡惡瘡敗疽，傷陰死肌，胃中邪氣，賊風(fēng)鬼?yè)簦�痱緩不收。除白癬疥蟲(chóng)。結(jié)熱不消，陰下痿，面上皯皰，令人肌滑。止驚邪血邪血疬，痢疾風(fēng)痹，赤眼癥結(jié)，溫?zé)岑懠�，發(fā)背瘰疬，腸風(fēng)癢痿，撲損，刀箭瘡，湯火瘡，生肌止痛。止肺血。附方：跌打骨折：酒調(diào)白芨末二錢服，其功不減自然銅、古銖錢也”。江西省、湖南省與云南省近15家中藥廠用白芨假鱗莖制白芨片、粉、糖漿與沖劑。白芨現(xiàn)已列入瀕危野生保護(hù)植物，也是云南省地道藥材及《中華人民共和國(guó)藥典》2005年版收載藥物。
　　2 白芨培育現(xiàn)狀
　　目前，白芨繁殖方式主要有2種：種子繁殖、分株繁殖。野生白芨種子非常細(xì)小，千粒重僅為0.005 6 g，缺乏營(yíng)養(yǎng)，常規(guī)播種育苗出苗率低，生長(zhǎng)緩慢。有的采用分株繁殖，分株繁殖雖然速度快、繁殖系數(shù)高，但是繁殖原材料耗費(fèi)較多，難以適應(yīng)大規(guī)模生產(chǎn)的需要。
　　自新世紀(jì)以來(lái)，國(guó)家把傳統(tǒng)的種植、養(yǎng)殖業(yè)與現(xiàn)代化生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（Good Agricultural Practice，GAP）相結(jié)合，加速了我國(guó)傳統(tǒng)中藥現(xiàn)代化生產(chǎn)管理。2002年7月我國(guó)正式頒布《中藥材生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（GAP），2003年9月頒布《認(rèn)證管理辦法》（試行）和《中藥材GAP認(rèn)證檢查評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)》（試行）。此規(guī)范即大家平時(shí)所說(shuō)的中藥材GAP（GAP for Traditional Chinese Medicine）。自提出中藥材GAP技術(shù)概念以來(lái)，國(guó)內(nèi)眾多中藥材生產(chǎn)基地、相關(guān)專業(yè)高職院校、科研院所和制藥企業(yè)就踏上了探索實(shí)施中藥材GAP之路。從2003年11月1日起國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局已正式受理中藥材GAP認(rèn)證申請(qǐng)。中藥材GAP技術(shù)不僅能繼承發(fā)揚(yáng)傳統(tǒng)的種植、養(yǎng)殖技術(shù)和經(jīng)驗(yàn)，而且可使按規(guī)范生產(chǎn)出的中藥材達(dá)到“優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)、穩(wěn)定、可控”的要求，使中藥材走出國(guó)門，縮小與國(guó)外發(fā)達(dá)國(guó)家之間的差距。因此，白芨開(kāi)展GAP技術(shù)栽培生產(chǎn)具有重大意義。而白芨組織培養(yǎng)是白芨GAP栽培種植的前提，所以白芨組織培養(yǎng)是目前及將來(lái)最佳的一種繁殖方式[2]。
　　3 白芨組織培養(yǎng)技術(shù)
　　3.1 外植體的選擇
　　外植體選擇健康白芨種子。
　　3.2 培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件
　�、贌o(wú)菌萌發(fā)的培養(yǎng)基為Kundson和MS培養(yǎng)基；②愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+2，4-D 1.1 mg/L+KT 0.12 mg/L；③分化培養(yǎng)基為MS+KT 2.04 mg/L；④生根培養(yǎng)基為MS+IBA 2.05 mg/L+NAA 1.84 mg/L。分化形成苗后連續(xù)光照。培養(yǎng)基均添加蔗糖22 g、瓊脂8 g[3]。
　　3.3 培養(yǎng)方法
　　首先，種子采集于成熟而未開(kāi)裂的蒴果，外果皮常規(guī)消毒，在無(wú)菌狀態(tài)下取出種子，接種于Kundson培養(yǎng)基上，30 d后可直接形成幼苗。
　　其次，種子萌發(fā)后，在②號(hào)愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基上快速形成白色或淡綠色的愈傷組織。
　　然后，叢生芽體的分化將上述愈傷組織轉(zhuǎn)入分化培養(yǎng)基③上，12～16 d后出現(xiàn)大量叢生芽體，光照后叢生芽轉(zhuǎn)變?yōu)榫G色，并可不斷增殖。
　　再次，生根培養(yǎng)將叢生芽體切割后轉(zhuǎn)接到④號(hào)生根培養(yǎng)基上，可長(zhǎng)出粗壯根系，如將愈傷組織轉(zhuǎn)入MS基本培養(yǎng)基中也可以分化出芽體和根系，但是生長(zhǎng)速度緩慢，一粒種子經(jīng)過(guò)上述多次轉(zhuǎn)移培養(yǎng)，可獲得大量植株，每株3～5枚葉片。
　　最后，試管苗移栽。白芨組培苗在培養(yǎng)瓶中長(zhǎng)至4～6 cm，可出瓶練苗。為使試管苗適應(yīng)新的自然環(huán)境，要將試管苗放在溫室內(nèi)煉苗4～6 d，以提高小苗的抗病能力。白芨練苗苗床pH值呈弱酸性，一般要求為5.8～6.8。移栽基質(zhì)可以使用天然腐殖質(zhì)，或35%珍珠巖+蛭石35%+泥炭15%+無(wú)菌壤土15%，只要管理到位，成活率可達(dá)90%。栽苗前，可用高錳酸鉀1 000倍液噴灑消毒[4]。
　　4 白芨組培苗GAP栽培技術(shù)要點(diǎn)
　　4.1 凈苗
　　出瓶取苗要操作規(guī)范，否則根部受損將嚴(yán)重影響成活率。開(kāi)瓶后向瓶?jī)?nèi)注入1/3清水，搖晃使白芨苗與營(yíng)養(yǎng)液分開(kāi)后，將瓶?jī)?nèi)苗和營(yíng)養(yǎng)液一起倒入洗苗盆內(nèi)，用清水沖洗干凈苗根部的營(yíng)養(yǎng)液。若清洗不干凈，用小刷輕刷后用清水沖洗干凈，將洗干凈的苗根部進(jìn)行消毒。不能用手直接搓揉苗根部。如果苗根部有部分交纏，不可強(qiáng)行分開(kāi)，以免拉扯造成傷口感染，整體栽種即可。

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