qRT-PCR法分析復(fù)發(fā)性SLE患者腸道雙歧桿菌、柔嫩梭菌數(shù)量的變化

　　摘   要：目的  運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（qRT-PCR）法分析系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者腸道菌群數(shù)量的變化，探討雙歧桿菌、柔嫩梭菌與復(fù)發(fā)性SLE活動(dòng)的關(guān)系。方法  提取糞便細(xì)菌組DNA，運(yùn)用qRT-PCR法分析此二菌絕對(duì)數(shù)量的變化。結(jié)果  SLE復(fù)發(fā)活動(dòng)期雙歧桿菌、柔嫩梭菌數(shù)量均較治療后穩(wěn)定期減少（P<0.05），對(duì)比正常對(duì)照組也均減少（P<0.05）。結(jié)論  雙歧桿菌、柔嫩梭菌菌群數(shù)量與SLE活動(dòng)度評(píng)分相關(guān)，腸道內(nèi)此二菌數(shù)量減少可能與SLE病情的復(fù)發(fā)有關(guān)。
　　關(guān)鍵詞：系統(tǒng)性紅斑狼瘡;雙歧桿菌;柔嫩梭菌;實(shí)時(shí)熒光定量PCR
　　中圖分類號(hào)：R593.241                                 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A                              DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2018.05.022
　　文章編號(hào)：1006-1959（2018）05-0065-05
　　Analysis of the Changes of Intestinal Bifidobacterium and Clostridium Tenella in Patients with Recurrent SLE by qRT-PCR
　　WU Xia1，XIAO Pan-pan1，XIE Xiao-ran1，SUN Xue-qian2，F(xiàn)U Bing-bing2，SUN Xiao-peng2
　�。�1.Jiamusi University，Jiamusi 154007，Heilongjiang，China;
　　2.Department of Rheumatological Immunology，F(xiàn)irst Affiliated Hospital of Jiamusi University，Jiamusi 154002，Heilongjiang，China）
　　Abstract：Objective  To investigate the relationship between bifidobacterium，Clostridium tenella and recurrent SLE activity in patients with systemic lupus erythematosus by real-time quantitative polymerase chain reaction（qRT-PCR）.Methods  The DNA of fecal bacteria group was extracted，and the absolute quantity of the two bacteria was analyzed by qRT-PCR method.Results  Bifidobacterium in the recurrent stage of SLE was found to be bifidobacterium.The number of Clostridium tenella was lower than that of stable period after treatment（P<0.05），compared with the normal control group，it was also decreased（P<0.05）.Conclusion  The number of bifidobacterium and Clostridium tenella was correlated with the SLE activity score，and the decrease of these two bacteria in the intestinal tract might be related to the recurrence of SLE.
　　Key words：Systemic lupus erythematosus;Bifidobacterium;Clostridium tenella;Real-time fluorescence quantitative PCR
　　系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）是一種累及全身各組織的自身免疫炎癥性疾病[1]，腸道內(nèi)多種細(xì)菌與SLE相關(guān)。越來(lái)越多的證據(jù)表明[2]，機(jī)體免疫功能的正常與宿主腸道內(nèi)微生物群和宿主免疫系統(tǒng)間的動(dòng)態(tài)平衡密切相關(guān)。Yeoh N等[3]提出腸道菌群與自身免疫病存在一定的關(guān)聯(lián)。2013年Kamada等[4]發(fā)現(xiàn)小鼠腸道內(nèi)微生物的菌群失調(diào)與多種自身免疫性疾病有關(guān)。2014年Hevia A[5]首次證實(shí)人SLE可致腸道中厚壁菌門/擬桿菌門數(shù)量改變。本研究旨在分析SLE患者在病情活動(dòng)期治療前、穩(wěn)定期治療后及正常對(duì)照組糞便中雙歧桿菌、柔嫩梭菌數(shù)量的變化，探討此二菌與復(fù)發(fā)性SLE病情活動(dòng)的關(guān)系。
　　1資料與方法
　　1.1一般資料  選取2015年12月～2016年12月佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院住院SLE患者30例為SLE組，男4例，女26例，年齡15～50歲，平均年齡（27.52±12.51）歲。對(duì)照組男4例，女26例，年齡11～50歲，平均年齡（26.81±13.70）歲。SLE組用藥為：潑尼松1 mg/（kg·d）至病情穩(wěn)定2周后每周減量10%，羥氯喹0.4 g/d。根據(jù)SLE活動(dòng)度評(píng)分（systemic lupus erythematosus disease activity index，SLEDAI）分為治療前活動(dòng)期組（≥5分）和治療后穩(wěn)定期組（≤4分）。納入標(biāo)準(zhǔn)：①11～50歲之間的非絕經(jīng)期女性和同年齡段的男性患者;②符合SLE診斷標(biāo)準(zhǔn)確診為狼瘡者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①首次確診SLE者;②合并嚴(yán)重的心腦血管、肝、腎、肺等疾病不能后續(xù)追蹤病情者;③合并消化道慢性疾病者;④近4周內(nèi)使用可能對(duì)菌群造成影響的藥物;⑤合并可引起口腔菌群改變的口腔疾病者。本實(shí)驗(yàn)已通過(guò)醫(yī)院倫理委員會(huì)同意。

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