排毒尪痹湯對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者血清轉(zhuǎn)化生長因子—B1的影響

　　摘要：目的 觀察排毒尪痹湯對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）患者血清轉(zhuǎn)化生長因子- B1（TGF-B1）含量的影響，從細胞因子角度探討該方藥的作用機制。方法 選擇RA活動期患者136例，隨機分為排毒尪痹湯治療的觀察組和吲哚美辛腸溶片、甲氨蝶呤片治療的對照組；于治療前和治療2個月后分別檢測血清TGF-B1含量。結(jié)果 治療2個月后，2治療組血清TGF-B1含量升高，有極顯著性差異（P<0.001），2組間比較差異無顯著性（P>0.05）。結(jié)論 RA患者體內(nèi)存在較低濃度的TGF-B1，可能是導(dǎo)致RA發(fā)病的機制之一；排毒尪痹湯能升高血清TGF-B1含量，有助于機體恢復(fù)免疫穩(wěn)定狀態(tài)，具有類似甲氨蝶呤的免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)。
　　關(guān)鍵詞：排毒尪痹湯；類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎；血清；轉(zhuǎn)化生長因子-B1
　　中圖分類號：R255.6 文獻標(biāo)志碼：B 文章編號：1007-2349（2018）02-0039-03
　　類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）是一種以關(guān)節(jié)及關(guān)節(jié)周圍組織的非感染性炎癥為主的全身性疾病，關(guān)節(jié)病變呈漸進性、不可逆性改變。近年來由于社會環(huán)境及飲食生活習(xí)慣改變，該病發(fā)病率不斷上升，本病雖以關(guān)節(jié)病變?yōu)橹鳎�但常常合并有多種全身和內(nèi)臟并發(fā)癥，目前RA 在國內(nèi)外仍屬原因不明的難治之癥，致殘率高。研究表明，細胞因子是RA炎癥和損傷的重要介質(zhì)，其中轉(zhuǎn)化生長因子（transforming growth factor-B1，TGF-B1）在RA中的作用近年來備受關(guān)注，尤其是TGF-B1參與RA炎癥過程的調(diào)節(jié)，被視為保護性因子。本院以少數(shù)民族的佤醫(yī)佤藥為基礎(chǔ)，通過10多年的處方篩選，總結(jié)出排毒尪痹湯，自2015 年1 月-2017年9 月，運用該方治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎68例。本研究觀察RA活動期患者血清TGF-B1含量的變化以及排毒尪痹湯對其影響，從細胞因子角度探討排毒尪痹湯治療RA 的作用機制，現(xiàn)報道如下。
　　1 資料與方法
　　1.1 臨床資料 采用隨機平行對照方法，在云南省臨滄市人民醫(yī)院中醫(yī)科選擇住院及門診患者136例，隨機分為觀察組和對照組，每組68例；2組一般資料經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，無顯著性差異（P>0.05），具有可比性。
　　1.2 納入標(biāo)準(zhǔn) （1）年齡15-70歲。（2）均符合美國風(fēng)濕病協(xié)會類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎修訂標(biāo)準(zhǔn)（1987）�；顒有訰A 診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]（需具備以下5項中4項）：①休息時有中等程度疼痛；②晨僵至少1h；③3個以上關(guān)節(jié)腫脹；④5個以上關(guān)節(jié)壓痛；⑤ESR或CRP高于正常。（3）中醫(yī)辨證符合國家衛(wèi)生部頒布的“濕熱型”標(biāo)準(zhǔn)。（4）知情同意：簽署知情同意書。
　　1.3 排除標(biāo)準(zhǔn) ①合并其他疾病、證候或合并癥。②3周內(nèi)已接受相關(guān)治療并可能影響效應(yīng)觀測指標(biāo)。③伴有可能影響效應(yīng)指標(biāo)觀測、判斷的其他生理或病理狀況。④嚴重心、肝、腎損害影響藥物代謝。⑤特殊人群：孕婦、哺乳期、精神病、病情危篤或疾病晚期。
　　1.4 退出標(biāo)準(zhǔn) ①不符合納人條件，納入錯誤或未按規(guī)定服藥無法判定療效。②資料不全無法判定療效、安全性。③嚴重不良反應(yīng)、并發(fā)癥，特殊生理變化等、難以繼續(xù)治療。④使用影響療效藥物。
　　1.5 診斷標(biāo)準(zhǔn)
　　1.5.1 西醫(yī)診斷 參照美國風(fēng)濕病學(xué)會（ARA）1987年對RA的診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]。
　　1.5.2 中醫(yī)診斷 參照《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》[2]。
　　1.6 治療方法 均連續(xù)治療4周為1療程，連續(xù)2療程。
　　1.6.1 觀察組 采用排毒尪痹湯治療，處方組成：娘母良10 g，小銅錘5 g，火把花根10 g（先煎），黃芪50 g，桂枝15 g，白術(shù)20 g，茯苓20 g，威靈仙20 g，淫羊藿25 g，枸杞子25 g，川斷30 g，紅花10 g，牛膝15 g，雞血藤30 g，秦艽15 g，甘草6 g 。每日1 劑，將火把花根用開水先煎2 h，再放入其他藥物煎煮1 h，取汁200 mL，如此煎煮2次，共煎400 mL，分早、晚2次飯后服。
　　1.6.2 對照組 吲哚美辛腸溶片（山西云鵬藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字H14020771，25 mg/片）25 mg/次，1次/d。甲氨蝶呤片（上海信誼藥廠有限公司，國藥準(zhǔn)字H31020644，2.5 mg/片）7.5 mg/次，1次/周。
　　1.7 療效判定 參照《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》[2]及瑞得治療研究協(xié)作組制定的RA療效標(biāo)準(zhǔn)[3]。臨床緩解：晨僵<15 min，無乏力，無關(guān)節(jié)痛及壓痛，無關(guān)節(jié)腫脹，血沉：男<20 mm/h，女<30 mm/h，其中≥4項；顯效：晨僵、關(guān)節(jié)痛及壓痛、關(guān)節(jié)腫脹數(shù)、握力、血沉改善≥50%，類風(fēng)濕因子（RF）滴度降低≥50%，其中≥4項；有效：晨僵、關(guān)節(jié)痛及壓痛數(shù)、關(guān)節(jié)腫脹數(shù)、握力、血沉改善≥50%、類風(fēng)濕因子（RF）滴度降低≥50%，其中≥3項；無效：晨僵、關(guān)節(jié)痛及壓痛數(shù)、關(guān)節(jié)腫脹數(shù)、握力、血沉改善≥50%，類風(fēng)濕因子（RF）滴度降低≥50%，其中<3項及病情惡化。
　　1.8 實驗室檢查 于治療前與治療2療程后分別收集患者的血清于-20℃凍存待測�；颊呒敖】但I血者取全血2 mL，患者及健康志愿在我院健康體檢者2 mL，分離血清，集中檢測，采用上海森雄科技實業(yè)有限公司提供的人轉(zhuǎn)化生長因子定量EIA試劑盒。血清標(biāo)本嚴格按試劑盒要求的步驟操作，采用雙抗體夾心ABC- ELI SA法，用抗人TGF- B1單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的T GF- B1與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人TGF- B1 抗體，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入酶底物OPD，，出現(xiàn)黃色，加終止液硫酸，顏色變深，采用美國Bio-TEK INSTRUMENTS EL340型酶標(biāo)儀，在492 nm 處測OD值，TGF- B1濃度與OD值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中TGF- B1濃度。

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