茵陳藥材質(zhì)量控制方法研究

　　摘 要 長期以來中藥存在著以劣充優(yōu)，互混、互代現(xiàn)象，質(zhì)量差異很大，而藥材的優(yōu)劣是保證復(fù)方中藥質(zhì)量的前提。為解決中藥材的質(zhì)量可控性問題，在完善藥材質(zhì)量標準時，應(yīng)選擇合適的指標成分對其進行質(zhì)量控制。本文通過對指標成分6，7-二甲氧基香豆素和阿魏酸的含量作為指標，考察樣品制備方法，完善藥材的質(zhì)量標準，為參芪肝康膠囊的質(zhì)量穩(wěn)定奠定基礎(chǔ)。
　　關(guān)鍵詞 茵陳；藥材質(zhì)量；方法研究；討論
　　1 試驗材料1.1 儀器
　　高效液相色譜儀（LC-10ATvp-UV），色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)（ANASTAR），電子分析天平（Sartorius），AB135-S電子分析天平，數(shù)顯恒溫水浴鍋（HH-2），超聲波清洗儀（DL-180） ，循環(huán)水式多用真空泵（SHB-Ⅲ（A）），真空干燥箱（DZF-1），石英亞沸高純水蒸餾器（SYZ-550）。
　　1.2 試劑
　　甲醇（色譜純），冰醋酸（分析純），甲醇（分析純），乙醇（分析純），乙醚（分析純），鹽酸（分析純）水（二次蒸餾水）。
　　1.3 藥品
　　6，7-二甲氧基香豆素（HPLC純度99.6%） 實驗室自制，阿魏酸對照品 ，中國藥品生物制品檢定所，茵陳藥材
　　采于沈陽北陵，黨參藥材 沈陽天益堂大藥房藥材均經(jīng)沈陽藥科大學生藥鑒定教研室孫啟時教授鑒定為正品。
　　2 茵陳藥材中6，7-二甲氧基香豆素的含量測定
　　2.1 色譜條件
　　色譜柱：Diamonsil C18 （200 mm × 4.6 mm，5 μm，迪瑪公司）；流動相：甲醇-0.5%冰醋酸溶液 （44：56，v/v）；流速：1.0 mL·min-1；檢測波長：240 nm；柱溫：室溫；進樣量：10 mL。
　　2.2 色譜系統(tǒng)適用性試驗
　　在上述色譜條件下，樣品中6，7-二甲氧基香豆素與其它組分達到了基線分離。理論塔板數(shù)按6，7-二甲氧基香豆素計算不低于3000。
　　2.3 溶液的制備
　　對照品溶液的制備 精密稱取6，7-二甲氧基香豆素對照品適量，置100 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，制成濃度為0.745 mg·mL-1的對照品儲備液。精密量取上述對照品儲備液1.0 mL，置10 mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液 （每1 mL中含6，7-二甲氧基香豆素74.5 mg）。
　　供試品溶液的制備 稱取干燥的藥材粉末 （過60目篩） 約0.1 g，精密稱定，置50 mL錐形瓶中，精密加入乙醇25 mL，超聲處理30 min，放冷至室溫，搖勻，濾過，減壓回收溶劑，殘渣用甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至10 mL量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，微孔濾膜（0.45 mm）濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。
　　2.4 測定法
　　精密吸取供試品溶液與對照品溶液各10 mL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，測量峰面積，按外標法以峰面積計算，即得。
　　2.5 方法學考察
　　標準曲線的繪制 取6，7-二甲氧基香豆素的儲備液，精密吸取0.2、0.4、0.8、1.2、1.6和2.0 mL，分別置10 mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，取上述溶液依次進樣，測量峰面積。分別以峰面積 （y） 對各自濃度 （x） 進行線性回歸，回歸方程為：y = 1.206 × 104x + 7.625 × 104，r = 0.9992，線性范圍為14.9～149 μg·mL-1。
　　色譜系統(tǒng)精密度試驗 取“供試品溶液的制備”項下的同一供試品溶液，連續(xù)進樣6次，每次10 mL，記錄色譜峰面積，6，7-二甲氧基香豆素峰面積的RSD為1.5 %。
　　方法重復(fù)性試驗 取同一編號的茵陳藥材6份，照“供試品溶液制備”項下方法操作，制備供試品溶液。依次進樣，記錄色譜峰面積，6，7-二甲氧基香豆素平均含量為4.00 mg·g-1，RSD為2.1 %。
　　溶液穩(wěn)定性試驗 取同一供試品溶液，分別于0、2、4、8、12和24 h進樣，測定峰面積，計算溶液中6，7-二甲氧基香豆素的含量。結(jié)果表明，6，7-二甲氧基香豆素在室溫放置24 h穩(wěn)定，RSD為2.0 %。
　　方法回收率試驗 精密稱取9份已知含量的同一編號的茵陳藥材各0.05 g，加入6，7-二甲氧基香豆素對照品儲備液 0.12、0.24和0.36 mL，照“供試品溶液的制備”項下方法操作，制備供試品溶液并進樣分析。測得6，7-二甲氧基香豆素的方法回收率為96.4%，RSD為1.8 %，
　　2.6 樣品測定
　　取3批樣品，照“供試品溶液的制備”項下的方法制備供試品溶液，精密量取供試品溶液10 mL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以峰面積按外標法計算相應(yīng)茵陳藥材中6，7-二甲氧基香豆素的含量。
　　2.7 討論
　　《中國藥典》2015年版一部中茵陳藥材的質(zhì)量標準中沒有含量測定項[1]。傳統(tǒng)中藥茵陳為參芪肝康膠囊方中主藥，具有清熱利濕、利膽退黃之功效，臨床上廣泛用于治療黃疸、肝炎等疾病[2]。茵陳在生長過程的幼苗階段（綿茵陳）與果實成熟期（茵陳蒿）中有效成分大不相同，其中具有保肝利膽功效的主要成分香豆素類，主要存在于茵陳蒿中[3]。所以本處方以茵陳蒿入藥，與本處方的藥效相符。經(jīng)研究證實，其口服后入血的主要成分為6，7-二甲氧基香豆素，且該成分具有利膽、保肝等生物活性，為茵陳的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)之一[4，5]，且在茵陳藥材中含量較高，可作為藥材的質(zhì)量控制指標成分。
　　本文考察了超聲提取法、回流提取法，并同時考察了95 %、75 % 和70 % 的乙醇溶液和95 %、75 % 的甲醇作為提取溶劑的提取率。結(jié)果證明，95 % 乙醇溶液超聲30 min的方法提取率高，干擾少，樣品處理簡便，快捷。
　　參考文獻：
　　[1]中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會主編.中華人民共和國藥典（2005年版）北京：人民衛(wèi)生出版社，2005
　　[2]謝韜，梁敬鈺，劉凈.茵陳化學成分和藥理作用研究進展.海峽藥學.2004，16（1）：8～13

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