茶葉浸提液對小鼠學(xué)習(xí)記憶能力影響的初步研究

　　摘 要：茶對人體具有降三高、減肥、提神、防老年癡呆癥等功效。然而學(xué)校大多數(shù)同學(xué)在口渴的情況下選擇喝茶葉水人數(shù)比例只占12.3%。因此，研究喝茶可能提高記憶能力、飲茶是否對青少年智力發(fā)展具有幫助具有意義。本文通過3項實驗，分別分析了不同配比的茶葉浸提液中茶多酚的含量測定，不同加工方式的茶葉浸提液對小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響，不同濃度的茶葉浸提液對小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響，最終喝茶對青少年智力發(fā)展具有一定作用的結(jié)論。
　　關(guān)鍵詞：茶葉浸提液；小鼠；學(xué)習(xí)；記憶能力；影響
　　中圖分類號：R944.26 文獻標(biāo)識碼：A DOI：10.11974/nyyjs.20160832075
　　緒論
　　資料[1-2]表明，長期飲用碳酸飲料容易引起肥胖、糖尿病、骨質(zhì)疏松等癥。通過調(diào)查問卷方式了解到在口渴情況下大多數(shù)同學(xué)是喝白開水，喝茶葉水（簡稱喝茶）比例只有12.3%。茶，是中華民族的舉國之飲，中國幾千年的飲茶史，足以證明飲茶的重要性。有資料[3]表明，茶葉中有益的成份主要是茶多酚和茶多糖，喝茶對人體有許多益處：如降血糖、降血壓、降血脂，可減肥、提神等，還可以防老年癡呆癥。
　　老年癡呆癥的癥狀之一是漸進式記憶障礙，而記憶能力是智力的重要組成，對學(xué)習(xí)能力影響非常大。青少年時期是一個人智力發(fā)展的高峰期，在國家提倡大健康的背景下，飲茶能否對青少年智力發(fā)展提供有益的幫助，這是值得研究的問題。通過查閱文獻，相關(guān)研究資料很少。因此決定建立“茶葉浸提液對小鼠學(xué)習(xí)記憶能力影響的初步研究”課題，對該問題進行研究。
　　1 材料和方法
　　課題組從2015年9月—2016年2月，利用課余、節(jié)假日，進行了以下3項實驗研究，分別是不同配比的茶葉浸提液中茶多酚含量的測定、不同加工方式的茶葉浸提液對小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響、不同濃度的茶葉浸提液對小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響。
　　1.1 實驗1
　　不同配比的茶葉浸提液中茶多酚含量的測定
　　1.1.1 實驗材料
　　本實驗材料采用按制造工藝分類的茶葉，即紅茶和綠茶，采用市場上常見的品牌和產(chǎn)地茶葉。實驗使用的綠茶為一級的龍井茶，產(chǎn)地是浙江杭州錢塘產(chǎn)區(qū)，產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)號為GB/T18650 ，廠商是杭州憶江南茶業(yè)有限公司；紅茶則為一級大紅袍，原料產(chǎn)地為云南臨滄，而產(chǎn)地則是福建漳州，產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)號為GB/T13738.2，廠商是漳州天福茶業(yè)有限公司。另外，本次實驗還用到了購買于上海金穗生物科技有限公司的茶多酚標(biāo)準(zhǔn)品（含量≥98%）、 KMnO4溶液、3moL/L H2SO4溶液、鄰二氮菲亞鐵指示劑（0.025moL/L）等。
　　1.1.2 實驗樣品配置
　　茶葉浸提液配比時，統(tǒng)一使用75mL的沸水，通過控制茶葉的重量來提取不同濃度的茶葉浸提取液。具體是分別將0.75g、0.83g、0.94g、1.07g、1.25g、1.50g、1.88克、2.50g、3.75g、7.50g的茶葉放入75mL的沸水中浸泡10min，得到配比為1：100、1：90、1：80、1：70、1：60、1：50、1：40、1：30、1：20、1：10的浸提液。
　　1.1.3 實驗方法
　　在本次實驗中主要采用的是高錳酸鉀滴定法[5]，用于測定各樣品中茶多酚的含量。
　　1.2 實驗2
　　不同加工方式的茶葉浸提液對小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響
　　1.2.1 實驗材料
　　本次實驗使用的動物是ICR雄性小鼠，鼠齡3周（浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實驗動物中心購得，許可證號：scxk（浙）2008-0033），飼料是由浙江省實驗動物飼料生產(chǎn)基地、浙江省實驗動物中心共同制造的，執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)為GB14924-2001。另外，墊料是經(jīng)121℃、30min高壓蒸汽滅菌木質(zhì)刨花，浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實驗動物中心購得，綠茶和紅茶與實驗一的相同。
　　1.2.2 實驗分組
　　實驗分為3組，分別為：對照1組——小鼠11只，飲用水為去氯自來水（存放24h后自來水）；綠茶組——小鼠15只，飲用水為配比1：30的綠茶浸提液；紅茶組——小鼠15只，飲用水為配比1：30的紅茶浸提液。3組小鼠其它生活條件相同。根據(jù)文獻[4]和人們的喝茶習(xí)慣，本實驗采用配比為1：30的茶葉浸提液。
　　1.2.3 實驗方法
　　1.2.3.1 觀察法
　　觀察法主要指的是在學(xué)校實驗室，小鼠自由攝食，飲水，飼養(yǎng)觀察35d，每天觀察小鼠活動情況，記錄小鼠飲水量，攝食量，每周稱量小鼠體重。
　　1.2.3.2 Morris水迷宮實驗
　　在飼養(yǎng)35d后，小鼠在水迷宮實驗室適應(yīng)3d，進行Morris水迷宮實驗。實驗分為“定位航行”和“空間搜索”2部分，定位航行實驗4d，每天記錄小鼠潛伏期；空間搜索實驗1d，記錄小鼠穿越平臺次數(shù)和Ⅰ象限的時間，通過這些數(shù)據(jù)來測試小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。
　　1.2.3.3 生化指標(biāo)檢測
　　水迷宮實驗結(jié)束后，解剖小鼠，提取腦組織，檢測腦組織丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）的活性。主要包括MDA含量測定和SOD活性測定，其中MDA含量測定主要采用的是硫代巴比妥酸（TBA）法[6]，操作步驟按MDA測定試劑盒說明操作，而SOD活性測定則是采用WST-1法[7]，按SOD測試盒說明操作。
　　1.3 實驗3
　　不同濃度的茶葉浸提液對小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響
　　1.3.1 實驗材料
　　本實驗采用的實驗材料與實驗二的相同
　　1.3.2 實驗分組為
　　對照2組——10只，飲用水為去氯自來水（存放24h后自來水）；綠茶組（1：10）——10只，飲用水為配比1：10的綠茶浸提液；綠茶組（1：30）——10只，飲用水為配比1：30的綠茶浸提液；綠茶組（1：100）——10只，飲用水為配比1：100的綠茶浸提液；紅茶組（1：10）——10只，飲用水為配比1：10的紅茶浸提液；紅茶組（1：30）——10只，飲用水為配比1：30的紅茶浸提液；紅茶組（1：100）——10只，飲用水為配比1：100的紅茶浸提液。

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