不同檢測(cè)方法在診斷隱球菌性腦膜炎中的臨床比較

　　【中圖分類號(hào)】R269.6 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】2095-6851（2018）03--02
　　近年來(lái)，隱球菌性腦膜炎的發(fā)病率越來(lái)越高，在國(guó)外已成為AIDS病最常見(jiàn)的并發(fā)癥之一，是AIDS死亡的首要原因。在國(guó)內(nèi)已將隱球菌病與病毒性肝炎等同列為乙類傳染性疾病，是人類面臨的一種嚴(yán)重的真菌病。臨床上隱球菌性腦膜炎還常在系統(tǒng)性紅斑狼瘡、白血病、淋巴瘤、AIDS等細(xì)胞免疫功能低下的病人中發(fā)生。隱球菌性腦膜炎主要是由隱球菌屬中的新生隱球菌侵犯中樞神經(jīng)系統(tǒng)而引起的一種深部真菌病，約占隱球菌感染的80%，預(yù)后嚴(yán)重，死亡率高，即使經(jīng)過(guò)正規(guī)治療，死亡率仍高達(dá)25%-60%，治療后的幸存者也常常留下嚴(yán)重的后遺癥.這是一種較新型的腦膜炎感染類型，且誤診率較高，常被誤診為其他類型的腦膜炎而造成診斷延誤甚至造成其他疾病的發(fā)生[1]。因此，如何早期快速診斷，及時(shí)抗真菌治療，提高患者的生存質(zhì)量就成為一個(gè)迫切需要解決的問(wèn)題，真菌培養(yǎng)和墨汁負(fù)染色檢測(cè)隱球菌容易漏檢，抗原檢測(cè)的陽(yáng)性率高，本試驗(yàn)旨在通過(guò)對(duì)不同方法檢測(cè)隱球菌腦膜炎的陽(yáng)性率的比較，探討其臨床價(jià)值，對(duì)隱球菌腦膜炎的早期診斷具有重要的參考意義。
　　1 資料與方法
　　1.1 臨床資料 選取2015年1月～2015年12月于我院確診的34例隱球菌性腦膜炎患者，男19例，女15例，年齡在20～70歲之間，平均年齡45歲，兩組患者的年齡、性別等一般情況無(wú)顯著差異。
　　1.2 方法 真菌D-肽聚糖是一種廣泛存在于真菌細(xì)胞壁的抗原成分，其它微生物、動(dòng)物及人的細(xì)胞成分和細(xì)胞外液均不含有。深部真菌感染患者中血漿真菌D-肽聚糖含量增高，兩者存在相關(guān)性。該試驗(yàn)運(yùn)用免疫膠體金的方法對(duì)血清及腦脊液中的隱球菌多糖抗原進(jìn)行定性檢測(cè)，敏感性高，可快速診斷疾病。
　　墨汁負(fù)染色法是診斷隱球菌性腦膜炎最簡(jiǎn)單、快速的方法。隱球菌在墨汁黑色的背景下可鏡檢到透亮的菌體和寬厚的莢膜，而非致病性隱球菌無(wú)莢膜。
　　腦脊液真菌培養(yǎng)是將腦脊液接種于沙保弱培養(yǎng)基上，25℃或37℃培養(yǎng)2-5天，陽(yáng)性標(biāo)本即可見(jiàn)乳白色菌落形成。
　　1.3 觀察指標(biāo) 對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果予以記錄，比較其陽(yáng)性檢出率，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行綜合分析。
　　1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 利用SPSS13.0軟件對(duì)檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用χ?檢驗(yàn)，認(rèn)為P<0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2 結(jié)果
　　不同方法的陽(yáng)性率檢驗(yàn)結(jié)果對(duì)比 經(jīng)比較，真菌D-肽聚糖抗原檢測(cè)的陽(yáng)性率高于墨汁負(fù)染色法，墨汁負(fù)染色法的陽(yáng)性率高于真菌培養(yǎng)，其中真菌D-肽聚糖抗原檢測(cè)的陽(yáng)性率最高，與其他方法比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）見(jiàn)表1。
　　3 討論
　　新型隱球菌性腦膜炎是由新型隱球菌感染腦膜或腦實(shí)質(zhì)所致。由于其癥狀的不典型性及治療的不規(guī)范，誤診率及病死率仍較高。近年來(lái)隨著廣譜抗生素、激素、免疫抑制藥的廣泛或不適當(dāng)應(yīng)用，以及免疫缺陷性疾病及器官移植患者的增加，該病罹患率呈增長(zhǎng)趨勢(shì)。病原體多從呼吸道吸入，形成肺部病灶后經(jīng)血液循環(huán)播散于腦膜。大量臨床資料表明，隱腦的療效和轉(zhuǎn)歸很大程度上取決于早期診斷，早期治療。隱球菌的莢膜是主要的致病因子，也是確定血清及腦脊液特異性的抗原基礎(chǔ)。腦脊液涂片墨汁染色鏡檢，操作簡(jiǎn)單、迅速，是診斷隱球菌腦膜炎直接而快速的診斷方法，但首次檢出隱球菌的陽(yáng)性率不高。而腦脊液真菌培養(yǎng)的缺點(diǎn)是耗時(shí)且陽(yáng)性率也不高，對(duì)治療后菌體的活力缺乏有效的判斷方法。臨床發(fā)現(xiàn)，隱球菌性腦膜炎患者經(jīng)治療后其腦脊液真菌培養(yǎng)、涂片鏡檢迅速轉(zhuǎn)為陰性，而此時(shí)隱球菌還存在于腦脊液中，其活性并沒(méi)有完全受到抑制，仍然可以在適當(dāng)條件下生長(zhǎng)，如果單純依賴真菌培養(yǎng)及鏡檢轉(zhuǎn)陰這一指標(biāo)停藥，則往往導(dǎo)致感染復(fù)發(fā)、治療失敗[2]。
　　本試驗(yàn)旨在傳統(tǒng)涂片墨汁負(fù)染色的基礎(chǔ)上，聯(lián)合真菌培養(yǎng)及真菌D-肽聚糖抗原來(lái)檢測(cè)隱球菌，探討早期診斷隱球菌性腦膜炎的方法。
　　本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，34例患者中腦脊液涂片墨汁負(fù)染色法首次檢出隱球菌的陽(yáng)性率88.2%（30/34）。檢測(cè)的敏感性與特異性依賴于檢測(cè)者的技術(shù)水平，因此，其應(yīng)用受到一定的限制。腦脊液真菌培養(yǎng)陽(yáng)性并鑒定為隱球菌，為隱腦診斷的金標(biāo)準(zhǔn)。但檢出率受下列多種因素的影響。（1）腦脊液提取過(guò)程無(wú)菌操作觀念不強(qiáng)，導(dǎo)致培養(yǎng)污染。（2）部分患者院外系統(tǒng)性抗真菌治療后，腦脊液培養(yǎng)需要更長(zhǎng)時(shí)間才可見(jiàn)菌落形成[3]。而真菌D-肽聚糖抗原檢測(cè)不僅可以檢測(cè)腦脊液中的隱球菌，還可以檢測(cè)血清中的隱球菌，是一種簡(jiǎn)便、快速、有效的診斷方法，在早期診斷中，其陽(yáng)性率明顯優(yōu)于真菌培養(yǎng)和墨汁負(fù)染色，但其陽(yáng)性率仍未達(dá)到100%，所以，若采用單一檢驗(yàn)有可能會(huì)出現(xiàn)假陰性，造成一定的誤診率。研究中還發(fā)現(xiàn)，三種方法聯(lián)合檢查的陽(yáng)性率明顯高于單獨(dú)檢查（P<0.05）提示將三種檢驗(yàn)方法結(jié)合起來(lái)可使檢驗(yàn)結(jié)果更加可靠，有助于提高臨床診斷的準(zhǔn)確率，可在隱球菌腦膜炎的輔助診斷中推廣使用，為臨床診療提供更加可靠的依據(jù)。
　　參考文獻(xiàn)
　　《養(yǎng)生保健指南：醫(yī)藥研究》 ， 2016 （47）：193-194
　　李京紅，張國(guó)俊.新型隱球菌腦膜炎腦脊液的檢測(cè)方法探討.中國(guó)實(shí)用神經(jīng)疾病雜志，2009，12：85-87.
　　王鑫，王冰，劉瑞春等檢測(cè)腦脊液抗原抗體對(duì)隱球菌性腦膜炎的診斷和療效評(píng)價(jià)研究[J]2012，15（3），2770-2773

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