廣西菲牛蛭藥材的高效毛細(xì)管電泳指紋圖譜研究
發(fā)布時(shí)間:2019-08-27 來(lái)源: 散文精選 點(diǎn)擊:
?[關(guān)鍵詞]高效毛細(xì)管電泳;指紋圖譜;菲牛蛭??
菲牛蛭Poecilobdella manillensis別名馬尼擬醫(yī)蛭,俗稱金邊螞蝗,隸屬于無(wú)吻蛭目、醫(yī)蛭科、牛蛭屬,主要分布于廣西、廣東、海南和福建等省區(qū)[1],野生資源豐富并且可以進(jìn)行人工養(yǎng)殖[2],其具有顯著的抗凝血、抗血栓、溶栓、抗血小板聚集活性[3-5],主要化學(xué)成分為脂肪酸、氨基酸和蛋白質(zhì)[6-7],其中以報(bào)道的活性成分為菲牛蛭素A和菲牛蛭素B[7] 、水蛭素P6、水蛭素P18[8],迄今為止作者未見(jiàn)任何關(guān)于指紋圖譜的報(bào)道,高效毛細(xì)管電泳技術(shù)廣泛應(yīng)用于脂肪酸、氨基酸和蛋白質(zhì)的分離、分析、鑒定,所以本實(shí)驗(yàn)采用高效毛細(xì)管電泳法對(duì)菲牛蛭藥材進(jìn)行了指紋圖譜研究,并同時(shí)對(duì)其抗凝血酶活性進(jìn)行了測(cè)定。?
1.儀器與試藥
Beckman Coulter P/ACETM MDQ毛細(xì)管電泳儀(美國(guó)BECKMAN COULTER公司),配有PDA檢測(cè)器與控溫系統(tǒng),儀器控制與數(shù)據(jù)采集通過(guò)Beckman 32 Karat 5.0工作站進(jìn)行;未涂層石英毛細(xì)管(75 μm×56 cm,河北永年銳灃色譜器件有限公司);PH計(jì)(PHS-3C,上海精密科學(xué)儀器有限公司);KQ5200B超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);分析天平(AG135,METTLER TO-LEDO);LXJ-ⅡB低速大容量多管離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠);定時(shí)可調(diào)速漩渦混合器(XW-01,上海醫(yī)大儀器廠);恒溫水浴鍋(DK-S26,上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)。
磷酸氫二鈉(分析純,批號(hào) 1200645,天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司);三羥甲基氨基甲烷(Tris,純度≥99.9%,批號(hào) 1004053,河北博海生物工程開(kāi)發(fā)公司);十二烷基硫酸鈉(SDS,分析純,批號(hào) 1003032,河北博海生物工程開(kāi)發(fā)公司);氫氧化鈉(分析純,批號(hào) 20100621,北京化工廠);鹽酸(分析純,批號(hào) 20100128,北京化工廠);甲醇(色譜級(jí),F(xiàn)isher);實(shí)驗(yàn)用水為超純水。
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