比較不同來源長春花藥材中文多靈含量的分析研究

　　[摘 要]目的 建立長春花中文多靈的含量分析方法，比較不同來源長春花藥材中文多靈的含量。方法 采用高效液相色譜法，以依利特C18柱為分析柱，甲醇∶水（體積比64∶36，以二乙胺和磷酸調(diào)pH11）為流動相，流速為1 mL/min；220 nm為檢測波長。 結(jié)果 紅色長春花、白色長春花以及恩平、陽江、廣州紫色長春花樣品中文多靈含量分別是1.561、0.390、0.982、0.622、0.587 mg/g。結(jié)論 不同來源的長春花中文多靈的含量差異較大。
　　[關(guān)鍵詞]高效液相色譜法；長春花；文多靈
　　中圖分類號：Q949.95文獻標(biāo)識碼：A文章編號：1009-914X（2013）17-0248-01
　　長春花（Catharanthus roseus （L.） Don.）為夾竹桃科長春花屬植物，原產(chǎn)于非洲馬達加斯加島西印度一帶的熱帶森林地區(qū)，早在宋代以前就傳入我國。全株入藥，有利尿止血、鎮(zhèn)定安神、平肝降壓等功效，常用來治療瘧疾、腹瀉、糖尿病、高血壓、皮膚病及何杰金氏病。長春花含有100多種吲哚生物堿，其中主要成分長春堿臨床上廣泛用于治療急性白血病、何杰金氏病、惡性淋巴肉瘤、絨毛膜上皮癌等。文多靈生物堿為長春花植物體內(nèi)合成長春堿的前體。長春花分布于全國各地，在廣東亦有大量栽培，而且種類繁多，但廣東省不同來源長春花藥材中文多靈的含量情況卻未見有文獻報道。本文采用高效液相色譜法對5批不同來源的長春花中文多靈的含量進行了測定。
　　1 儀器與試藥
　　天美LC 2000高效液相色譜儀，包括LC2030紫外檢測器，LC2130 PUMP，T2000P色譜工作站。
　　文多靈對照品購于天津中新藥業(yè)，純度為99.5%，符合HPLC定量分析的要求；分析用長春花樣品采自廣州或廣東其他地區(qū)，經(jīng)本校藥用植物教研室曾令杰副教授鑒定為長春花（Catharanthus roseus （L.） Don.），白花長春花（Catharanthus roseus var. albus G. Don，Vinca rosea var. alba Sweet）；甲醇為色譜純，水為雙蒸水。
　　2 方法與結(jié)果
　　2.1 色譜條件及系統(tǒng)適應(yīng)性考察
　　色譜柱：Yilite C18柱（10 μm，4.6 mm×250 mm）；流動相：甲醇水（體積比64∶36，以二乙胺和磷酸調(diào)pH11）；流速：1 mL/min；進樣量：20 μL；檢測波長：220 nm。在該色譜條件下，文多靈的保留時間為13.591 min。
　　2.2 對照品的制備
　　精密稱取文多靈0.010 80 g置25 mL量瓶中，用甲醇溶解并定容至25 mL，搖勻，即得質(zhì)量濃度為0.432 0 mg/mL的對照品貯備液，置冰箱中保存，備用。
　　2.3 樣品溶液的制備
　　精密稱取干燥藥材粉末各2 g，以氨水浸潤加三氯甲烷70 mL在室溫下超聲提取30 min，濾過，精密量取續(xù)濾液50 mL，蒸干，用甲醇溶解并完全轉(zhuǎn)移至10 mL的量瓶中，甲醇定容，即得。
　　2.4 線性關(guān)系考察
　　分別精密吸取“2.2”項下對照品貯備液1、2、3、4、5 mL置10 mL量瓶中，用甲醇定容，搖勻，配成濃度分別為0.043 2，0.086 4，0.129 6，0.172 8，0. 216 0 mg/mL的對照品溶液，按“2.1”項下色譜條件進行測定，以文多靈質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，測得峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為
　　y=24416182.870x+218182（R2=0.999，n=5）
　　結(jié)果表明，文多靈檢質(zhì)量度在0.043 2～0.216 0 mg/mL范圍內(nèi)與峰面積積分值線性關(guān)系良好。
　　2.5 精密度試驗
　　分別精密吸取“2.2”項下對照品貯備液20 μL，按“2.1”項下色譜條件重復(fù)進樣5次，結(jié)果，峰面積積分值的RSD=1.79%，符合HPLC定量分析要求。
　　2.6 加樣回收率試驗
　　取同一批長春花樣品6份，每份約1 g，分別精密加入對照品溶液適量，按“2.3”項下提取制備供試品溶液，并按“2.1”項下色譜條件進行含量測定，計算回收率。結(jié)果表明文多靈的平均回收率為97.2%，RSD=1.68%。
　　2.7 樣品的測定
　　分別精密吸取“2.3”項下樣品溶液20 μL，按“2.1”項下色譜條件測定。結(jié)果表明：不同來源的長春花中文多靈含量差異較大，紅色長春花中的含量最高，紫色長春花中的含量次之，白色長春花中的含量最少；陽江產(chǎn)與恩平產(chǎn)的紫色長春花中文多靈含量也有差異。
　　3 討論
　　3.1 本文先后采用甲醇水（以二乙胺和磷酸調(diào)pH11）體積比為60∶40，62∶38，64∶36，65∶35的流動相進行分離，結(jié)果以體積比為64∶36時，文多靈得到了較好的分離，峰形良好，回收率穩(wěn)定，并且其他成分對文多靈的檢測不形成干擾，說明建立的分析方法可行。
　　3.2 研究結(jié)果表明，不同來源的長春花中文多靈含量有較大的差異，紅色長春花中文多靈的含量最高，紫色長春花次之，白色長春花含量最少。不同產(chǎn)地的長春花文多靈含量差異也較大，在所檢測的紫色長春花中，恩平所產(chǎn)的文多靈含量最高，陽江的次之，廣州的最低。表明遺傳因素和環(huán)境條件都影響著長春花中文多靈的含量水平。
　　3.3 本文首次對不同來源的長春花藥材中文多靈的含量進行了探討，為長春花品種的篩選和培育提供了科學(xué)的依據(jù)，為中藥材長春花的規(guī)范化栽培奠定了基礎(chǔ)。參考文獻
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