兩面針?biāo)幉奶崛∥矬w外抑菌作用研究

　　【摘要】 目的：探索兩面針?biāo)幉牡捏w外抑菌作用。方法：采用紙片瓊脂擴(kuò)散法，觀(guān)察兩面針?biāo)幉奶崛∥飳?duì)臨床常見(jiàn)感染病菌的抑制作用。結(jié)果：兩面針提取物對(duì)9種臨床常見(jiàn)感染細(xì)菌（金黃色葡萄球菌、大腸埃希氏菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、傷寒沙門(mén)氏菌、肺炎克雷伯氏菌、甲型溶血性鏈球菌、乙型溶血性鏈球菌、肺炎鏈球菌）均有不同程度的體外抑制作用。結(jié)論：兩面針?biāo)幉奶崛∥镌隗w外對(duì)9種臨床常見(jiàn)感染細(xì)菌有抑制作用。
　　【關(guān)鍵詞】 兩面針；瓊脂擴(kuò)散法；體外抑菌作用
　　【Abstract】：Objective To study on the antibscterial action of extracts of Zanthoxylum nitidum（Roxb.）DC.in vitro.Methods To observe the antibscterial action of extracts of Zanthoxylum nitidum（Roxb.）DC.On common clinical bacterials with disc agar diffusion method.Results The extracts of Zanthoxylum nitidum（Roxb.）DC.showed strong inhibitory effects on common clinical pathogens such as Staphylococcus aureus， Escherichia coli， Bacillus aeruginosus， Bacillus subtilis ，Salmonella typhi，， Klebsiella pneumoniae and Hemolytic streptococcuses.Conclusion The extracts of Zanthoxylum nitidum（Roxb.）DC.has strong inhibition on bacteria in vistro.The results provide a basis for clinical application of Zanthoxylum nitidum（Roxb.）DC.
　　【Key words】：Zanthoxylum nitidum（Roxb.）DC.； disc agar diffusion method；bacteriostatic action in vitro.
　　【中圖分類(lèi)號(hào)】R28 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B【文章編號(hào)】1004-4949（2015）02-0099-01
　　基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目“兩面針生物活性與化學(xué)特征相關(guān)指紋圖譜的研究”（30760302）；廣西壯族自治區(qū)科技廳自然科學(xué)基金項(xiàng)目（0832127）
　　兩面針是廣西特色藥材之一，其植物來(lái)源為蕓香科植物兩面針 Zanthoxylum nitidum（Roxb.）DC.的根，廣泛應(yīng)用于中醫(yī)處方、中成藥及精細(xì)化工產(chǎn)品中，具有驅(qū)風(fēng)化濕、消腫止痛、行氣之功效[1，2]�，F(xiàn)代藥理研究表明兩面針具有良好的抑菌、抗炎、鎮(zhèn)痛、抗腫瘤、抗氧化等作用[3～5]。為闡明兩面針的抗炎抑菌作用，本文采集廣西南寧，崇左，百色，玉林，欽州等22個(gè)產(chǎn)地的兩面針?biāo)幉�，�?duì)兩面針?biāo)幉奶崛∥锏捏w外抑菌作用進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究。
　　1 材料和方法
　　主要儀器和試劑：M-H瓊脂[6] ，購(gòu)自北京陸橋技術(shù)有限責(zé)任公司；氯化鈉，二甲基亞砜（DMSO）等有機(jī)試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純；無(wú)菌綿羊全血，廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。實(shí)驗(yàn)菌種均購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢驗(yàn)所。兩面針?biāo)幉模�采自廣西崇左等22個(gè)產(chǎn)地。
　　1.1樣品配置
　　取藥材，洗凈泥沙，切薄片，陰干，粉碎，過(guò)40目篩，稱(chēng)取藥粉6g，加氯仿40mL回流提取，濾過(guò)，回收氯仿，殘?jiān)�用乙醇定容�?0mL量瓶中。
　　提取物用直徑為 0.22μm 的微孔濾膜過(guò)濾除菌，選用新華層析濾紙，用打孔機(jī)制成直徑6mm圓片。高壓滅菌烘干后，加藥液浸泡過(guò)夜，置恒溫箱中烘干，4℃ 保存[6]。
　　1.2 直接菌落法制備菌懸液：取各菌37℃18～24h 純培養(yǎng)物，用無(wú)菌生理鹽水校正到濃度相當(dāng)于0.5麥?zhǔn)蠘?biāo)準(zhǔn)比濁標(biāo)準(zhǔn)，無(wú)菌生理鹽水1∶10稀釋備用。
　　1.3 體外抑菌研究
　　采用紙片瓊脂擴(kuò)散法進(jìn)行抑菌試驗(yàn)。用無(wú)菌棉簽將菌液分別均勻涂布于M-H瓊脂平板表面，含藥慮紙片緊貼于瓊脂表面，接種好的平皿置室溫待菌液被瓊脂吸收后把瓊脂平皿倒置放入35℃±2℃培養(yǎng)箱孵育16～20h（鏈球菌20～24 h）觀(guān)察結(jié)果。每個(gè)藥物抑菌試驗(yàn)重復(fù)3次，抑菌結(jié)果為3次試驗(yàn)平均值。抑制菌指數(shù)判斷：如抑菌圈直徑等于6mm，說(shuō)明對(duì)該菌種無(wú)抑制作用；抑菌圈直徑越大，抑菌作用越強(qiáng)。
　　2 結(jié)果；
　　3 討論；
　　所選廣西各產(chǎn)地兩面針?biāo)幉奶崛∥飳?duì)9種細(xì)菌均有不同程度的抑制作用，對(duì)金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、傷寒沙門(mén)氏菌、 肺炎克雷伯氏菌抑制作用較強(qiáng)，而對(duì)大腸埃希氏菌 和鏈球菌的抑制作用較差，對(duì)銅綠假單胞菌抑制作用最弱。綜合比較22個(gè)產(chǎn)地中，廣西崇左和玉林產(chǎn)的兩面針?biāo)幉囊志�活性較高。但各產(chǎn)地藥材對(duì)9種細(xì)菌的抑菌活性強(qiáng)度不盡相同。兩面針?biāo)幉囊志�作用的活性成分和體內(nèi)試驗(yàn)有待進(jìn)一步研究。
　　參考文獻(xiàn)
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　　[3] 劉華鋼，黃秋潔，賴(lài)茂祥.中藥兩面針的研究概況. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥. 2007，18（1）：222～223.
　　[4] 姚榮成，胡疆.兩面針化學(xué)成分及其藥理活性研究概況. 藥學(xué)實(shí)踐雜志.2004，22（5）：264～267.
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　　[6] 徐叔云，卞如濂，陳修.藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].第3版，北京：人民衛(wèi)生出版社.2002，1647-1660.

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