不同炮制品瑞香狼毒藥材急性毒性試驗(yàn)研究

　　摘要 [目的]通過對(duì)瑞香狼毒藥材急性毒性試驗(yàn)的研究，對(duì)瑞香狼毒生品、醋制品和姜礬制品的急性毒性進(jìn)行比較，為瑞香狼毒炮制工藝的規(guī)范化和臨床用藥安全提供試驗(yàn)依據(jù)。[方法]按照經(jīng)典急性毒性試驗(yàn)方法，各組試驗(yàn)連續(xù)觀察10d，計(jì)算各組動(dòng)物死亡數(shù)，采用Bliss法計(jì)算小鼠的LD50及其95%的可信限。[結(jié)果]瑞香狼毒生品LD50=547.56mg/kg，其95%的可信限為476.86～625.58mg/kg；醋制品LD50=689.23mg/kg，其95%的可信限為546.96～817.22mg/kg；姜礬制品LD50=976.89mg/kg，其95%的可信限為826.95～1134.50mg/kg。[結(jié)論]瑞香狼毒生品經(jīng)炮制后毒性有所降低，毒性由小到大的排列順序?yàn)榻�礬制品<醋制品<生品。
　　關(guān)鍵詞 瑞香狼毒；炮制品；急性毒性試驗(yàn)
　　中圖分類號(hào) S567 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 0517-6611（2015）09-072-01
　　瑞香狼毒其主要的活性成分有黃酮類、二萜類、香豆素類以及木脂素類化合物[1]。文獻(xiàn)資料報(bào)道瑞香狼毒中黃酮類和二萜原酸酯類具有較強(qiáng)的體內(nèi)和體外抗腫瘤作用，同時(shí)也是瑞香狼毒的主要有毒成分[2]。所以，采用適當(dāng)?shù)呐谥品椒�可以避免有效成分的損失，降低毒性。筆者通過對(duì)瑞香狼毒藥材急性毒性試驗(yàn)的研究，計(jì)算急性毒性參數(shù)，對(duì)生品、醋制品和姜礬制品的毒性進(jìn)行比較，為瑞香狼毒炮制工藝的規(guī)范化和臨床用藥安全提供試驗(yàn)依據(jù)。
　　1 材料與方法
　　1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
　　清潔級(jí)昆明種小鼠，體重18～22g，雌雄各半，由大連醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，使用許可證號(hào)SCXK（遼）2013-0002。
　　1.2 試驗(yàn)藥品
　　瑞香狼毒藥材購(gòu)自于內(nèi)蒙古，經(jīng)遼寧中醫(yī)藥大學(xué)王冰教授鑒定為正品藥材。瑞香狼毒生品、醋制品和姜礬制品的樣品液均自制。
　　1.3 樣品液的制備
　　精密稱取瑞香狼毒生品、醋制品和姜礬制品的粉末各（過60目篩）50g，分別加入95%乙醇500ml，加熱回流1h，過濾，濾液濃縮，蒸干，得干膏，用30%的1，2丙二醇為溶劑，超聲溶解備用。
　　1.4 主要儀器與設(shè)備
　　電子分析天平（D432810821）；腹腔注射器等。
　　1.5 劑量與分組
　　通過預(yù)試驗(yàn)所得到的全死劑量和全不死劑量，設(shè)定給藥劑量，組距=0.8。同時(shí)設(shè)立溶媒對(duì)照組，即30%的1，2丙二醇組，以觀察溶劑是否對(duì)小鼠產(chǎn)生影響。給藥劑量分組情況如表1所示。
　　1.6 急性毒性測(cè)定 生品組、醋制品組和姜礬制品組中清潔級(jí)小鼠各50只，體重18～22g，雌雄各半，按體重隨機(jī)分為5組，每組10只。試驗(yàn)前禁食（不禁水）12h，采用腹腔注射法，注射劑量0.2ml/10g。各組連續(xù)觀察10d，計(jì)算各組動(dòng)物死亡數(shù)，采用Bliss法計(jì)算小鼠的LD50及其95%的可信限。
　　2 結(jié)果與分析
　　2.1 瑞香狼毒生品組急性毒性試驗(yàn)
　　由表2可見，按瑞香狼毒生品組劑量等級(jí)1組給藥后，小鼠明顯出現(xiàn)活動(dòng)困難、呼吸急促，死亡時(shí)間短暫，最短時(shí)間約3min，其余小鼠30min內(nèi)全部死亡；劑量等級(jí)5組給藥，小鼠死亡率明顯下降，僅有1只小鼠死亡；其他等級(jí)給藥，小鼠明顯活動(dòng)困難，呼吸急促、步態(tài)不穩(wěn)。死亡率按照用藥劑量的降低有所升高。給藥24h后，未亡小鼠飲食飲水逐漸恢復(fù)正常，存活小鼠產(chǎn)生的毒性反應(yīng)隨時(shí)間慢慢恢復(fù)�？瞻讓�(duì)照組和溶媒對(duì)照組未見有小鼠異常反應(yīng)和死亡。
　　2.2 瑞香狼毒醋制品組急性毒性試驗(yàn)
　　表3顯示，按瑞香狼毒醋制品組劑量等級(jí)1組給藥后，小鼠同樣出現(xiàn)活動(dòng)困難、呼吸急促，但死亡時(shí)間延長(zhǎng)，在12h內(nèi)陸續(xù)死亡，僅有1只小鼠存活；劑量等級(jí)5組給藥，小鼠死亡率下降，僅有2只小鼠死亡；其他等級(jí)給藥，小鼠肌肉痙攣明顯，靜伏少動(dòng)，死亡時(shí)間延長(zhǎng)至48h�？瞻讓�(duì)照組和溶媒對(duì)照組未見有小鼠異常反應(yīng)和死亡。
　　2.3 瑞香狼毒姜礬制品組急性毒性試驗(yàn)
　　按瑞香狼毒姜礬制品組劑量等級(jí)1組給藥后，小鼠死亡時(shí)間延長(zhǎng)至48h內(nèi)陸續(xù)死亡，1只小鼠存活；劑量等級(jí)5組給藥，小鼠死亡率下降，僅有1只小鼠死亡；其他等級(jí)給藥，死亡時(shí)間延長(zhǎng)至60h。
　　空白對(duì)照組和溶媒對(duì)照組未見有小鼠異常反應(yīng)和死亡（表4）。
　　2.4 LD50及其可信限
　　由表5可知，生品LD50=547.56mg/kg，其95%的可信限為476.86～625.58mg/kg；醋制品LD50=689.23mg/kg，其95%的可信限為546.96～817.22
　　mg/kg；姜礬制品LD50=976.89mg/kg，其95%的可信限為826.95～1134.50mg/kg。
　　表5 瑞香狼毒不同炮制品急性毒性試驗(yàn)LD50的測(cè)定結(jié)果
　　組別LD50mg/kgLD5095%可信限∥mg/kgLD50提高指數(shù)
　　瑞香狼毒生品547.56476.86～625.581.0000
　　瑞香狼毒醋制品689.23546.96～817.211.2587
　　瑞香狼毒姜礬制品976.89826.95～1134.501.7841
　　3 小結(jié)與討論
　　試驗(yàn)結(jié)果表明瑞香狼毒經(jīng)炮制后毒性有所降低，毒性由小到大的排列順序?yàn)榻�礬制品<醋制品<生品，說明瑞香狼毒經(jīng)姜礬制后毒性降低的程度優(yōu)于醋制，確實(shí)達(dá)到了降低毒性，提高用藥安全性的作用。
　　現(xiàn)今文獻(xiàn)報(bào)道中，對(duì)瑞香狼毒生品的藥效藥理、毒性試驗(yàn)報(bào)道的較多，而其醋制品和姜礬制品方面的文獻(xiàn)報(bào)道較少。該試驗(yàn)將其生品和炮制品在急性毒性方面的不同進(jìn)行研究，通過三者的LD50及LD50的可信限，比較三者毒性強(qiáng)弱順序，對(duì)進(jìn)一步了解炮制作用、闡明炮制機(jī)理具有重要意義。
　　參考文獻(xiàn)
　　[1]王敏.瑞香狼毒總黃酮提取物的抗腫瘤作用[J].中國(guó)中藥雜志，2005，30（8）：603-606.
　　[2]湯亞杰，徐小玲，李冬生，等.瑞香狼毒化學(xué)成分與抗腫瘤作用研究進(jìn)展[J].中成藥，2008，30（7）：21-23.

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