小柴胡顆粒制劑的多波長(zhǎng)指紋圖譜及藥材—制劑譜峰匹配分析

　　[摘要] 目的 分析小柴胡顆粒制劑的多波長(zhǎng)指紋圖譜及藥材-制劑譜峰匹配。方法 運(yùn)用反相高效液相色譜法（RP-HPLC 法）對(duì)3 個(gè)廠家及實(shí)驗(yàn)室自制12批小柴胡顆粒評(píng)價(jià)多波長(zhǎng)指紋圖譜相似性，并匹配實(shí)驗(yàn)室自制小柴胡顆粒相同色譜條件下所用的原藥材指紋圖譜譜峰；運(yùn)用RP-HPLC法對(duì)不同來(lái)源的小柴胡顆粒中的指標(biāo)成分的量進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果 210 nm、254 nm、323 nm波長(zhǎng)下，A廠和實(shí)驗(yàn)室自制小柴胡顆粒的r1、r2均>0.9，B、C兩廠的r1、r2均<0.9，280 nm波長(zhǎng)下12批小柴胡顆粒的r1、r2均>0.9，210 nm、254 nm、280 nm、323 nm波長(zhǎng)下來(lái)自同一廠家3個(gè)批次的小柴胡顆粒均具有極小的相似度差異；A廠和實(shí)驗(yàn)室自制制劑和柴胡藥材的匹配相似度≥0.900，B廠和C廠<0.900。結(jié)論 小柴胡顆粒制劑的多波長(zhǎng)指紋圖譜及藥材-制劑譜峰匹配能夠?qū)⒂行�參考提供給臨床對(duì)中藥制劑質(zhì)量進(jìn)行較為全面的評(píng)價(jià)，值得在臨床推廣。
　　[關(guān)鍵詞] 小柴胡顆粒制劑；多波長(zhǎng)指紋圖譜；藥材-制劑譜峰；匹配
　　[中圖分類號(hào)] R95 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1672-5654（2017）10（a）-0042-02
　　中藥具有廣泛的成分和復(fù)雜的作用機(jī)制，局限性較大，這是因?yàn)槠滟|(zhì)量控制的標(biāo)準(zhǔn)僅僅是某種活性組分的量[1-2]。該實(shí)驗(yàn)對(duì)12批小柴胡顆粒的RP-HPLC 指紋圖譜進(jìn)行了研究，將4個(gè)波長(zhǎng)下的指紋圖譜分別選取了出來(lái)，選取過(guò)程中嚴(yán)格依據(jù)制劑用藥材特性，同時(shí)匹配了制劑及其原藥材指紋圖譜的譜峰，并考察了樣品化學(xué)組成的總體波動(dòng)情況，將匹配結(jié)合制劑用藥材和制劑指紋圖譜多指標(biāo)成分定量測(cè)定的方法提了出來(lái)，現(xiàn)報(bào)道如下。
　　1 儀器和材料
　　儀器采用美國(guó)Waters生產(chǎn)的M32色譜管理站、2996 型二極管陣列檢測(cè)器、2695 型高效液相色譜儀，材料采用北京化工廠生產(chǎn)的磷酸、冰醋酸分析純，山東禹王實(shí)業(yè)有限公司禹城化工廠生產(chǎn)的甲醇、乙腈色譜純，蘭州醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院藥劑科提供的超純水，蘭州黃河藥材市場(chǎng)提供的100201傘形科柴胡屬植物南柴胡的干燥根柴胡，蘇州華葆藥業(yè)有限公司（A廠）生產(chǎn)的小柴胡顆粒1、2、3，批號(hào)分別為20070204、20061006、20061205，甘肅岷海制藥有限責(zé)任公司（B廠）生產(chǎn)的小柴胡顆粒4、5、6，批號(hào)分別為20070502、20070810、20061101，云南白藥集團(tuán)股份有限公司（C廠）生產(chǎn)的小柴胡顆粒7、8、9，批號(hào)分別為20070507、20070913、20061219，實(shí)驗(yàn)室自制制劑小柴胡顆粒10、11、12，批號(hào)分別為20071011、20071121、20071229及柴胡皂苷a、d，批號(hào)分別為110777-200507、110778-200506，中國(guó)藥品生物制品檢定所提供的對(duì)照品。
　　2 方法和結(jié)果
　　2.1 色譜條件
　　Kromasil ODS保護(hù)柱、大連依利特C18色譜柱的規(guī)格分別為10 mm×4.6 mm，5 μm、250 mm×4.6 mm，5 μm，進(jìn)行梯度洗脫時(shí)將流動(dòng)相設(shè)定為乙腈-0.5%磷酸水溶解，梯度程度：0～10 min、10～30 min、30～45 min、45～60 min、60～70 min乙腈濃度分別為10%～25%、25%～45%、45%～55%、55%～80%、80%～100%，體積流量、柱溫、色譜圖光譜采集范圍分別為0.8 mL/min、25℃、210～410 nm[3-4]。
　　2.2 小柴胡顆粒樣品溶液的制備
　　在100 mL具塞三角瓶中放置稱取出來(lái)的10.0 g小柴胡顆粒精密，將50 mL甲醇精密加入其中，對(duì)質(zhì)量進(jìn)行精密成定，進(jìn)行30 min的超聲處理，放置到室溫，將質(zhì)量稱定并對(duì)減失的質(zhì)量進(jìn)行補(bǔ)足，補(bǔ)足過(guò)程中用甲醇，搖勻，用微孔濾膜濾過(guò)，微孔濾膜直徑為0.45 μm，將續(xù)濾液取出來(lái)備用，將每個(gè)小柴胡顆粒樣品溶液樣品分為3份，然后對(duì)其進(jìn)行平行處理。
　　2.3 色譜柱相似性分析
　　將上述12批小柴胡顆粒樣品溶液取出來(lái)進(jìn)樣，容量為10 μL，依據(jù)上述色譜條件將小柴胡顆粒制劑的指紋圖譜建立起來(lái)。具體見(jiàn)表1。210 nm、254 nm、323 nm波長(zhǎng)下，A廠和實(shí)驗(yàn)室自制小柴胡顆粒的r1、r2均>0.9，B、C兩廠的r1、r2均<0.9，280 nm波長(zhǎng)下12批小柴胡顆粒的r1、r2均>0.9，210 nm、254 nm、280 nm、323 nm波長(zhǎng)下來(lái)自同一廠家3個(gè)批次的小柴胡顆粒均具有極小的相似度差異。
　　2.4 制劑和藥材譜峰匹配
　　將10 μL柴胡藥材樣品溶液、10 μL柴胡皂苷a和10 μLd對(duì)照品溶液取出來(lái)進(jìn)樣，將柴胡藥材色譜圖獲取過(guò)來(lái)，獲取過(guò)程中依據(jù)上述色譜條件，將210 nm色譜圖提取出來(lái)。對(duì)小柴胡顆粒模式進(jìn)行匹配，匹配過(guò)程中依據(jù)譜峰匹配方法，參照峰為1號(hào)峰，匹配峰的相對(duì)保留時(shí)間及峰面積具體見(jiàn)表2，共有匹配峰5個(gè)，柴胡皂苷a、d的匹配峰不存在，發(fā)生這一現(xiàn)象的原因是水提柴胡過(guò)程中水解了柴胡皂苷a、d。如果小柴胡顆粒的制備工藝為水提取，那么其也不含柴胡皂苷a、d，和相關(guān)醫(yī)學(xué)學(xué)者[5-6]研究結(jié)果一致。A廠和柴胡藥材的匹配相似度為0.900，B廠為0.844，C廠為0.555，實(shí)驗(yàn)室自制制劑為0.930，A廠和實(shí)驗(yàn)室自制制劑和柴胡藥材的匹配相似度≥0.900，B廠和C廠<0.900。
　　3 結(jié)論
　　小柴胡顆粒制劑的多波長(zhǎng)指紋圖譜及藥材-制劑譜峰匹配能夠?qū)⒂行�參考提供給臨床對(duì)中藥制劑質(zhì)量進(jìn)行較為全面的評(píng)價(jià)[7]，值得在臨床推廣。
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