波形蛋白在子宮頸鱗癌中的表達(dá)及臨床意義

　　【摘要】 目的 探討子宮頸鱗癌組織中波形蛋白（Vimentin）的表達(dá)及其與臨床特征之間的關(guān)系。
　　方法 選取12例子宮頸上皮正�；颊摺�13例宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）Ⅰ級(jí)患者、21例CINⅡ～Ⅲ級(jí)患者、42例子宮頸鱗癌患者作為研究對(duì)象， 采用免疫組化法檢測(cè)其組織中Vimentin表達(dá)情況， 觀察不同組織類型的Vimentin表達(dá)差異及子宮頸鱗癌Vimentin表達(dá)與臨床病理特征的相關(guān)性。結(jié)果 正常的子宮頸上皮細(xì)胞組織中Vimentin的表達(dá)率為0（0/12）， 均呈陰性；CINⅠ級(jí)組織中Vimentin的高、低表達(dá)率分別為0（0/14）、23.1%（3/13）；CINⅡ～Ⅲ級(jí)組織Vimentin的高、低表達(dá)率分別為0（0/21）、47.6%（10/21）；子宮頸鱗癌組織中Vimentin的高、低表達(dá)率分別為16.7%（7/42）、71.4%（30/42）；不同組織間Vimentin表達(dá)率比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。Vimentin表達(dá)與子宮頸鱗癌臨床分期以及淋巴轉(zhuǎn)移呈明顯相關(guān)關(guān)系（r=0.816、0.799， P=0.007、0.040<0.05）。結(jié)論 Vimentin表達(dá)的升高對(duì)子宮頸鱗癌的發(fā)展起重要推動(dòng)作用， 且Vimentin表達(dá)與淋巴轉(zhuǎn)移等有密切關(guān)系。
　　【關(guān)鍵詞】 子宮頸鱗癌；波形蛋白表達(dá)；臨床特征；病理特征
　　DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2018.12.023
　　子宮頸癌是嚴(yán)重威脅婦女生命健康的生殖系統(tǒng)惡性腫
　　瘤[1]。以往研究發(fā)現(xiàn)人乳頭瘤狀病毒（HPV）感染與宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān)， 但具體發(fā)病機(jī)制仍不清楚。已有研究表明 [2]， 在人乳頭瘤狀病毒感染的正常上皮細(xì)胞中發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymal transition， EMT）現(xiàn)象[3]。Vimentin是一種重要的Ⅲ型中間絲纖維蛋白， 可作為組織病理學(xué)診斷中鑒別腫瘤細(xì)胞分化起源的特異性生物標(biāo)記物[4]。Vimentin的高表達(dá)意味著EMT過程的發(fā)生開啟了腫瘤轉(zhuǎn)移過程， 是引起腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵步驟。作者觀察了Vimentin在宮頸癌及其前期病變中的定位與表達(dá)水平， 探討Vimentin表達(dá)情況與臨床特征之間的關(guān)系， 報(bào)告如下。
　　1 資料與方法
　　1. 1 一般資料 選取2015年6月～2017年6月遼陽(yáng)市第五人民醫(yī)院收治的12例子宮頸上皮正�；颊撸ㄐ腥�子宮加雙附件切除子宮肌瘤）、13例CINⅠ級(jí)患者、21例CINⅡ～Ⅲ級(jí)
　　患者、42例子宮頸鱗癌患者作為研究對(duì)象， 所有患者在手術(shù)前都沒有采取任何治療措施。所有患者的診斷均經(jīng)過經(jīng)病理檢查證實(shí)。子宮頸鱗癌患者年齡31～59歲， 平均年齡48歲；CINⅠ級(jí)患者年齡31～56歲， 平均年齡47歲；CINⅡ～Ⅲ級(jí)患者年齡29～58歲， 平均年齡46歲；子宮頸上皮正�；颊吣挲g40～60歲， 平均年齡51歲。各類型患者年齡等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性。
　　1. 2 方法 采集所有研究對(duì)象子宮頸組織制作標(biāo)本， 標(biāo)本經(jīng)常規(guī)多聚甲醛固定、連續(xù)切片、石蠟包埋。所采集的標(biāo)本經(jīng)液氮冷凍后， 轉(zhuǎn)入-70℃冰箱中保存?zhèn)溆肹5]。免疫組織化學(xué)用鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物霉連結(jié)法（SP）法， 用己知陽(yáng)性片作陽(yáng)性對(duì)照， 磷酸鹽平衡生理鹽水（PBS）代替一抗作陰性對(duì)照。將切片進(jìn)行脫蠟至水；并置于構(gòu)椽酸鹽中， 進(jìn)行高壓修復(fù)抗原， 2 min后取出， 冷卻至室溫；采用3%濃度的過氧化氫封閉， 將內(nèi)源性的過氧化氫酶去除；滴加一抗
　　（50 μl）后， 在37℃下進(jìn)行孵育， 2 h后用PBS進(jìn)行沖洗， 連續(xù)沖洗3次；再滴加生物素標(biāo)記二抗（50 μl）， 在室溫下進(jìn)行孵育， 30 min后用PBS沖洗， 連續(xù)沖洗3次；再滴加二氨基聯(lián)苯胺（DAB）溶液（50 μl）， 進(jìn)行蘇木精復(fù)染；將復(fù)染后的組織進(jìn)行梯度乙醇脫水， 用二甲苯透明作為透明劑， 用中樹膠將染好的切片封存。
　　1. 3 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) Vimentin陽(yáng)性表達(dá)定位于細(xì)胞質(zhì)， 其顆粒染色呈現(xiàn)為黃色和棕黃色。免疫組化評(píng)分采用簡(jiǎn)單的半定量方法， 通過著色程度以及陽(yáng)性細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)獲得， 其計(jì)算公式為：總評(píng)分=著色程度評(píng)分×著色細(xì)胞百分?jǐn)?shù)評(píng)分；其中總評(píng)分0分為陰性表達(dá)， 總評(píng)分1～4分為低表達(dá)， 總評(píng)分>4分為高表達(dá)。①根據(jù)細(xì)胞的陽(yáng)性著色程度（即細(xì)胞的抗原含量）評(píng)分得出：0分為陰性；1分為弱陽(yáng)性；2分為中等陽(yáng)性；3分為強(qiáng)陽(yáng)性。②在光鏡下， 任意選取4個(gè)高倍視野（×400）， 計(jì)數(shù)出200個(gè)以上的細(xì)胞， 根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)， 評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)為：0分表示沒有陽(yáng)性細(xì)胞；1分表示陽(yáng)性細(xì)胞≤10%；2分表示陽(yáng)性細(xì)胞在11%～50%；3分表示陽(yáng)性細(xì)胞在51%～80%；4分表示陽(yáng)性細(xì)胞>80%。
　　1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料采用方差分析；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)；相關(guān)性采用Spearman分析。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2 結(jié)果
　　2. 1 子宮頸鱗癌患者臨床病理特征 子宮頸鱗癌患者中年齡<45歲24例、占57.1%， ≥45歲18例、占42.9%；臨床分期Ⅰ期22例、占52.4%， 臨床分期Ⅱ期20例、占47.6%；高、中、低分化宮頸癌病例分別為5、16與21例， 各占11.9%、38.1%與50.0%；淋巴轉(zhuǎn)移者13例、占比31.0%， 未轉(zhuǎn)移者29例、占69.0%；國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟（FIGO）手術(shù)分期（2000年標(biāo)準(zhǔn)）：Ⅰ期22例、占52.4%， Ⅱ期20例、占47.6%。
　　2. 2 所有研究對(duì)象中Vimentin表達(dá)情況 正常的子宮頸上皮細(xì)胞組織中Vimentin的表達(dá)率為0（0/12）， 均呈陰性；CINⅠ級(jí)組織中Vimentin的高、低表達(dá)率分別為0（0/14）、23.1%（3/13）；CINⅡ～Ⅲ級(jí)組織Vimentin的高、低表達(dá)率分別為0（0/21）、47.6% （10/21）；子宮頸鱗癌組織中Vimentin的高、低表達(dá)率分別為16.7% （7/42）、71.4% （30/42）；不同組織間Vimentin表達(dá)率比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

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