煙葉唇柱苣苔組培苗的生根與移栽技術(shù)研究

　　摘要：以煙葉唇柱苣苔無菌芽苗為試材，研究基本培養(yǎng)基、糖濃度和不同生長素對其根系分化及移栽基質(zhì)對組培苗移栽成活率的影響。結(jié)果表明，生根培養(yǎng)基為MS+NAA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L時，組培苗生根率高達(dá)100%，生根數(shù)多;在珍珠巖基質(zhì)中栽培的生根苗，成活率高，生長狀況好，是煙葉唇柱苣苔組培苗移栽的合適基質(zhì)。
　　關(guān)鍵詞：煙葉唇柱苣苔;葉片;離體培養(yǎng);生根;移栽;培養(yǎng)基
　　中圖分類號： Q943.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A
　　文章編號：1002-1302（2015）04-0206-02
　　收稿日期：2014-06-06
　　基金項目：海南省科學(xué)事業(yè)費(fèi)項目（編號：瓊財預(yù)[2013]131號）。
　　作者簡介：潘 梅（1962—），女，廣西隆安人，高級園藝師，從事植物組織培養(yǎng)與開發(fā)利用研究。Tel：（0898）65380711;E-mail：panmei200@sina.com。
　　通信作者：姜殿強(qiáng)，碩士，副研究員，從事藥用植物資源開發(fā)與利用研究。Tel：（0898）65393907;E-mail：dqjiang2004@163.com。
　　煙葉唇柱苣苔（Chirita heterotricha Merr.）是苦苣苔科唇柱苣苔屬多年生草本植物，是海南特有珍稀苦苣苔科植物，分布于海南的瓊中、瓊海、保亭、三亞、白沙、東方，生長于海拔約430 m的山谷林中或溪邊石上[1]。煙葉唇柱苣苔根狀莖粗約1.5 cm，頂部節(jié)間長1.0～2.2 cm;葉對生或簇生，橢圓或長橢圓形;花序腋生，不分枝或2～3回分枝，有花2～15朵;花冠淡紫色或白色，花期長達(dá)6個月，是一種適合觀賞和園藝的野生花卉，尚無人工栽培。煙葉唇柱苣苔可種子繁殖或葉片扦插繁殖，但受季節(jié)限制或繁殖系數(shù)低、繁殖速度慢，離體培養(yǎng)是種苗快速繁殖最為有效的方法。 組培苗的生根與移栽是組培快繁中最為關(guān)鍵的一環(huán)，關(guān)系到工廠化育苗能否成功。目前，關(guān)于煙葉唇柱苣苔組織培養(yǎng)的研究極少[2]，組培生根培養(yǎng)及出瓶移栽方面的研究更為有限。本試驗針對煙葉唇柱苣苔生根階段的培養(yǎng)基配方選擇和移栽基質(zhì)的優(yōu)化進(jìn)行探討，旨在提供一套科學(xué)的生根移栽技術(shù)，為煙葉唇柱苣苔種苗快繁提供依據(jù)。
　　1 材料與方法
　　1.1 試驗材料
　　無菌煙葉唇柱苣苔芽苗，由海南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院園林花卉研究所組培繁殖。
　　1.2 不同培養(yǎng)基配方對小苗生根的影響
　　除試驗項外，所有培養(yǎng)基中均添加蔗糖30 g/L、卡拉膠9.0 g/L，滅菌前pH值為6.0。取高約1.2 cm的小苗接入各生根培養(yǎng)基中，每袋接種3株，每處理均接種8袋，重復(fù)3次;接種后，在光照度1 500 lx、光照時間9 h/d、溫度（26±2） ℃條件下培養(yǎng);接種30 d后統(tǒng)計生根率、生根數(shù)及株高。
　　1.2.1 基本培養(yǎng)基對小苗生根的影響 以1/4MS、1/2MS 、3/4MS、MS作為基本培養(yǎng)基，各添加NAA 0.5 mg/L。
　　1.2.2 糖濃度對小苗生根的影響 以MS+NAA 0.5 mg/L為基本培養(yǎng)基，蔗糖濃度分別設(shè)置為10、20、30、40、50 g/L共5種處理。
　　1.2.3 生長素種類對小苗生根的影響 以MS為基本培養(yǎng)基，分別添加NAA、IBA、IAA各0.5 mg/L，以不添加任何生長素的MS培養(yǎng)基作為對照。
　　1.3 移栽基質(zhì)對組培苗成活率的影響
　　無根苗在生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)30 d時，根系發(fā)達(dá)、有6～8張葉片，將其移入拱棚內(nèi)煉苗7 d即可移栽。將苗從培養(yǎng)袋中取出，洗凈根部培養(yǎng)基，注意不要傷到根系和葉片，分別栽種到珍珠巖、河沙、表土和珍珠巖+河沙+表土配比為 1 ∶ 1 ∶ 1 的4種基質(zhì)中，每種基質(zhì)栽種35株，澆透定根水，用透明塑料薄膜覆蓋保濕，遮陽網(wǎng)遮陰，30 d后統(tǒng)計成活率。
　　2 結(jié)果與分析
　　2.1 不同培養(yǎng)基配方對小苗生根的影響
　　2.1.1 不同基本培養(yǎng)基對小苗生根的影響 由表1可見，在4種基本培養(yǎng)基中，組培苗生根率均達(dá)100%，但平均根數(shù)、株高及生長狀況有差異。在MS培養(yǎng)基中，平均生根數(shù)最多，達(dá)22.78條，與其他處理差異極顯著，株高最高，為 2.18 cm，植株生長狀況好，植株健壯，葉色深綠;1/2MS和3/4MS培養(yǎng)基誘導(dǎo)生根效果次之，二者的平均生根數(shù)和株高接近，平均根數(shù)分別為19.39、19.84條，株高分別為2.06、2.07 cm，兩者之間差異極不顯著，植株較健壯;1/4MS培養(yǎng)基生根數(shù)最少，只有17.08條，且植株矮小、細(xì)弱，株高僅 1.57 cm。煙葉唇柱苣苔小苗生根最適宜的基本培養(yǎng)基是MS。
　　表1 不同基本培養(yǎng)基對煙葉唇柱苣苔小苗生根的影響
　　基本培養(yǎng)基 生根率
　�。�%） 根數(shù)
　�。�條） 株高
　�。╟m） 生長狀況
　　1/4MS 100A 17.00C 1.57B 較弱、葉綠
　　1/2MS 100A 19.39B 2.06A 較壯、葉綠
　　3/4MS 100A 19.84B 2.07A 健壯、葉深綠
　　MS 100A 22.78A 2.18A 健壯、葉深綠
　　2.1.2 不同糖濃度對小苗生根的影響 由表2可見，最低濃度和最高濃度的蔗糖生根效果均相對較差，10 g/L蔗糖時煙葉唇柱苣苔生根率和生根數(shù)最低，分別為74.6%和11.22條，其株高最高，為2.28 cm，植株細(xì)弱，葉片淡黃色，蔗糖為50 g/L時的生根率也較低，為90.0%，其生根數(shù)16.94條，植株矮小，葉色黃綠，莖基部膨大;蔗糖為 20、30、40 g/L時的生根率均達(dá)到100%，其中，30 g/L時的生根數(shù)最多，達(dá)到2022條，極顯著高于其他處理，其株高為2.14 cm，與10 g/L時的株高差異不顯著，且植株健壯，葉深綠色。煙葉唇柱苣苔小苗生根培養(yǎng)基的蔗糖濃度宜選用30 g/L。

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