正交試驗法從茶葉中提取咖啡因的工藝研究

　　摘要 [目的] 研究從茶葉中提取咖啡因的工藝。[方法]從茶葉中提取天然咖啡因，以微波進(jìn)行前處理，乙醇作為溶劑，利用索氏提取器進(jìn)行提取。以得到的咖啡因的產(chǎn)量為評價指標(biāo)，運用正交試驗原理考察了微波功率、微波時間、乙醇濃度和浸提時間對產(chǎn)量的影響。[結(jié)果]試驗優(yōu)選出了茶葉中咖啡因提取的最佳工藝條件：稱取8 g茶葉，微波功率為240 W，微波時間為3 min，乙醇濃度為95%，索氏提取器提取時間為1.5 h，此條件下咖啡因產(chǎn)量為 89.2 mg。[結(jié)論] 研究可為茶葉中咖啡因的提取提供參考依據(jù)。
　　關(guān)鍵詞 茶葉；咖啡因；提�。徽�交試驗
　　中圖分類號 S609.9 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A 文章編號 0517-6611（2015）19-274-02
　　茶葉是世界三大飲料之一[1]，具有降壓、抗氧化、抗腫瘤、降低膽固醇、提神、增強機體免疫力等作用[2]。據(jù)已有的研究資料表明，茶葉中含有糖類、多種氨基酸、生物堿、茶多酚等多種成分，其中，咖啡因的含量約占茶葉干重的2%～5%[3-4]。從茶葉中提取咖啡因的方法較多，其中浸提法、索氏提取法、微波輔助提取法、超聲波輔助提取法等已有報道[5]，以微波進(jìn)行前處理，結(jié)合索氏提取法尚未見報道。筆者以乙醇作為提取溶劑，以得到的咖啡因的產(chǎn)量為評價指標(biāo)，運用正交試驗，考察微波輻射功率、輻射時間、乙醇濃度和索氏提取時間4個因素對咖啡因提取產(chǎn)量的影響，尋找一個提取率比較高的新工藝流程。
　　1 材料與方法
　　1.1 材料 原料：信陽毛尖，市售。主要試劑：無水乙醇。主要儀器：索氏提取器；電子天平；微波化學(xué)反應(yīng)器WBFY-201，上海丞明儀器設(shè)備有限公司。
　　1.2 方法 用粉碎機將茶葉粉碎，過60目篩。分別稱取8 g樣品，置于微波反應(yīng)器中，以不同的功率、不同的時間進(jìn)行輻射。前處理后，將樣品進(jìn)行包裹，放入索氏提取器中，選用不同濃度的乙醇，提取不同時間后，將索氏提取裝置改為蒸餾裝置， 回收大部分的乙醇，然后將濃縮液轉(zhuǎn)移至蒸發(fā)皿中，加入3 g生石灰，邊加熱邊攪拌，待蒸干水和乙醇后，升華，收集產(chǎn)品，稱重，測定其熔點。
　　2 結(jié)果與分析
　　2.1 正交試驗影響因素的選擇 溶劑是影響提取率的重要因素之一，咖啡因易溶于乙醇，因此把乙醇的濃度作為主要的考察因素之一；同時，微波功率、微波時間、浸提時間均會影響咖啡因的提取率，因此把這4 個因素同時作為考察因素。試驗的影響因素和水平見表1。
　　2.2 正交試驗結(jié)果 為了提高咖啡因的產(chǎn)量，試驗考察了4個影響因素和3個水平，故選用4因素3水平9次試驗的正交試驗表L9（34）。正交試驗設(shè)計及試驗結(jié)果見表2。
　　R為各因素的極差，反映了各因素影響試驗指標(biāo)的主次關(guān)系。R越大，說明該因素對試驗指標(biāo)的影響越大，因此也就越重要。由極差分析結(jié)果可以看出，以提取產(chǎn)量為考察指標(biāo)，4種因素對咖啡因提取產(chǎn)量的影響大小程度依次為：乙醇濃度、提取時間、微波時間、微波功率。從表2可得出，正交試驗范圍內(nèi)的較優(yōu)的提取條件為D3C2B1A2，即乙醇濃度95%，提取時間1.5 h，微波功率240 W，微波輻射時間3 min，在此條件下8 g茶葉中咖啡因的提取量89.2 mg。
　　F值是指因素水平的改變引起的的平均偏差平方和與誤差的平均偏差平方和的比值，比值的大小反映了各因素水平對試驗結(jié)果影響程度的大小。若F>F0，說明該因素水平的改變對試驗結(jié)果有顯著的影響，兩數(shù)差別越大，說明該因素影響的顯著性越大。由方差分析可得出，乙醇濃度對試驗結(jié)果影響顯著；微波功率、微波時間和提取時間對試驗結(jié)果影響不顯著。各因素對試驗結(jié)果的影響顯著性次序為：因素D（乙醇濃度，F(xiàn)=28.691）>因素C（提取時間，F(xiàn)=4.627）>因素B（微波時間，F(xiàn)=1.912）>因素A（微波功率，F(xiàn)=1.000），其中T臨界值=19.000。
　　由極差和方差分析得出，乙醇的濃度是影響咖啡因提取產(chǎn)量的主要因素，95%乙醇提取的效果最好，其次是提取時間、微波時間和微波功率。
　　2.3 產(chǎn)品分析
　　2.3.1 熔點測試。
　　外觀：白色針狀晶體。干燥后測其熔點為233～234 ℃，熔程短，純度較高。
　　2.3.2 紅外光譜分析。 得到的咖啡因產(chǎn)品經(jīng)紅外分析，得到譜圖，如圖1所示。
　　由圖1可見，3 116 cm-1處為芳環(huán)上的C-H伸縮振動，744 cm-1處為其變角振動；1 703和1 667 cm-1處分別為2位和6位C原子上的C=O伸縮振動；1 548 cm-1處為芳環(huán)上4、5原子的C=C伸縮振動；1 484 cm-1為N-CH3的C-H彎曲振動；1 024 cm-1處為C-N伸縮振動吸收峰。由此確定該物質(zhì)為咖啡因。
　　2.4 驗證試驗 用上述條件D3C2B1A2，進(jìn)行3次平行試驗，結(jié)果3次平行試驗從8 g茶葉中提取咖啡因含量依次為85.1、93.3、84.4 mg，平均提取量為87.6 mg，提取率高且具有重復(fù)性，驗證了所選提取工藝條件的合理性。
　　3 結(jié)論
　　以信陽毛尖為原料，采用微波輻射和索氏提取器聯(lián)合提取，利用正交試驗方法，優(yōu)化出了較佳的工藝條件：微波功率240 W，輻射時間3 min，乙醇濃度95%，提取時間1.5 h，產(chǎn)量為8 g茶葉可提取咖啡因89.2 mg。李玉賢等利用索氏提取器，采用正交試驗的方法，咖啡因的產(chǎn)量為33.6 mg/8g[6]；楊兵等采用微波提取法，得到咖啡因的產(chǎn)量為38.9 mg/5g[7]。用微波進(jìn)行前處理后，再用索氏提取器進(jìn)行提取，咖啡因的產(chǎn)量明顯提高，并且純度比較高。因此從產(chǎn)量、試驗時間和儀器要求等方面綜合考察，該工藝條件較為理想。
　　參考文獻(xiàn)
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